人表皮生长因子慢病毒载体的构建及表达.pdfVIP

of ·603· Jou__malZhengzhouUniversity(Medical Sciences)Jul．—2—010——V——ol—．—45—N—o—．—4 TR，Bernards R．A for 表达，而在多种实体肿瘤和造血系统肿瘤中高表达， [4]BrummelkampR，Agamisystem stable of8hon RNAsinmammalian 同时伴有酶活性的升高。7。。多种肿瘤样本和细胞 expressioninterfering 系均出现DNMTl的高表达，如肝癌’8。、胃癌p。、卵 cells【j]．Science，2002，296(5567)：550 a1． 巢癌¨叫及子宫内膜癌…。等。因此dnmtl有可能作[5]AbreuPA，Dellamora—OrtizG，Leao．FerreiraLR．et DNA forthe ten- methylation：a twenty—first promisingtarget 为肿瘤治疗的一个重要靶点。 Ther Opin 035 tury[J]．ExpertTargets，2008，12(8)：1 作者设计了针对人dnmtl基因3个位点的siR， zM．MammalianDNA [6]Svedruzic cytosine NA，通过GenBank数据库BLAST分析，3个siRNA mechanism．basedin． Dnmtl：enzymaticmechanism．flovel 编码序列与人和动物其他基因无明显同源性，保证 hibitors，andRNA-directedDNA 了RNAi的特异性。构建的dnmtlsiRNA真核表达 Med Chem，2008，15(1)：92 载体使用了Hl启动子指导siRNA编码序列的转[7]Luczak PP．Thero]eofDNA MW，Jagodzifiski methylation incancer Histochem 录、PolⅢ识别的转录终止信号，经过酶切和测序分