DNA结合抑制蛋白1及VEGF在结肠癌中的表达及其临床意义.docVIP

精品论文 参考文献 DNA结合抑制蛋白1及VEGF在结肠癌中的表达及其临床意义 樊鸿炎张文权薛迪强杜宏伟郝芳李素萍 　　兰州市第二人民医院甘肃兰州730000 　　通讯作者：张文权，男，1967年2月生，普外科主任医师 　　【摘要】 　　目的探讨结肠癌中DNA结合抑制蛋白1及VEGF的表达与肿瘤细胞分化程度、浸润深度、淋巴结转移及TNM分期的关系。方法用原位杂交的方法分别检测17例结肠腺瘤、16例不典型增生、48例结肠癌及15例癌旁正常组织中Id－1的表达，然后用免疫组化法检测VEGF在48例结肠癌中的表达。结果正常肠粘膜组织中Id－1蛋白偶有表达，在结肠腺瘤、不典型增生、结肠癌组织中的阳性表达率分别为353%、4375%、7708%，三者比较差别有统计学意义（Plt;005）。Id1及VEGF表达与分化程度无关（P＞005），与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有关，差异有统计学意义（Plt;005）。结论Id－1蛋白、VEGF在结肠癌组织中表达明显升高，并与结肠癌侵袭转移及TNM临床分期相关，可作为结肠癌预后判断的指标之一。 　　【关键词】结肠癌；DNA结合抑制蛋白1；血管内皮生长因子 　　【中图分类号】R7353+5 　　【文献标识码】B【文章编号】16748999(2013)12025001 　　结肠癌在我国的发病率有增高的趋势。死亡率仅次于肺癌和肝癌，占我国恶性肿瘤第三位。DNA结合抑制蛋白是1990年Robert Benezra等首先从MEL细胞cDNA文库中克隆出来的，以其抑制分化的作用而被人们认识［1、2］。 　　本实验应用原位杂交和免疫组化的方法研究探讨Id1、VEGF与结肠癌生物学行为及临床、病理的关系，为结肠癌的预后提供临床参考。 　　1材料与方法 　　11资料： 　　48例结肠癌及相应的癌旁组织为兰州市第二人民医院2007年2010年外科手术切除标本。男37例，女11例，中位年龄5326岁。组织学分型采用WHO标准，高分化腺癌14例，中分化腺癌22例，低分化腺癌12例；Ti+T1+T2者21例，T3+T4者27例；TNM分期0Ⅱ期13例，ⅢⅣ期35例；伴有淋巴结转移者32例，无淋巴结转移者16例。癌旁组织中16例为不典型增生，15例为正常粘膜。48例癌组织全部为腺癌。17例结肠腺瘤标本来自我院，患者行内镜下息肉切除术，术后经病理证实为腺瘤。组织标本经甲醛固定，石蜡包埋，行4um连续切片。 　　12试剂： 　　原位杂交试剂购自武汉博士德公司，操作步骤严格按照说明书进行。所有标本经HE染色观察再次证实其病理性质。免疫组化试剂盒购自福州迈新生物技术开发公司，采用常规SP两步法。 　　13结果观察及判断标准： 　　根据细胞染色程度（A），以细胞质内出现棕色颗粒为表达，无染色为0分；细胞质内见淡黄色颗粒，明显高于背景为1分；较多棕黄色颗粒为2分；大量深棕色颗粒为3分。每片随机观察5个高倍视野（times;400）计数癌细胞总数和表达的细胞个数，得出细胞表达百分率（B）；B＜30％为1分，30％～75％为2分，＞75％为3分。Atimes;B得0分者为不表达（－）；1－4分为低表达（＋）；大于4分为高表达（++）。 　　14统计学方法： 　　应用统计软件包SPSS100分析资料，等级资料采用秩和检验－KruskalWallis法，组间两两比较采用秩和检验－Nemenyi法，计数资料采用chi;2检验，检验水准alpha;=005。 　　2结果 　　21Id1在正常肠粘膜、结肠腺瘤、不典型增生及结肠癌组织中的表达 正常肠粘膜组织中Id－1蛋白偶有表达，在结肠腺瘤、不典型增生、结肠癌组织中的阳性表达率分别为353%、4375%、7708%，三者比较差别有统计学意义（Plt;005）。（见图1、2） 　　22结肠癌中Id1及VEGF表达与临床病理特征的关系 Id1的表达与分化程度无关（P＞005），与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期有关，差异有统计学意义（Plt;005）。（见表2，图3、4） 　　表2Id、VEGF表达与结肠癌分期、分化程度、浸润、 　　及淋巴结转移的关系（%） 　　 　　3结论 　　DNA结合抑制蛋白又称分化抑制因子，属于螺旋－环－螺旋转录因子家族成员之一，对碱性HLH转录因子活性起负调节作用。作为HLH家族成员的Id分子由于缺乏与DNA的E2或N2框结合的强碱性区域，不能启动转录，但又可竞争性与bHLH结合成异二聚体后，抑制bHLH与DNA及其他组织特异性bHLH转录因子结合，从而抑制细胞分化，对碱性HLH转录因子活性起负调节作用。因此，Id蛋白又被称作“分化抑制因子”。正常细胞Id随细胞