HPLC 法测定牛至肝康胶囊的含量.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC 法测定牛至肝康胶囊的含量 （1广西强寿药业集团有限责任公司；广西南宁530003，2广西康华药业有限责任公司；广西南宁530003） 　　【摘要】目的：建立高效液相色谱法测定牛至肝康胶囊中迷迭香酸的含量。方法：采用 Agilent 1260serier SB-C18 色谱柱（5mu;m，4.6 mmtimes;250mm），乙腈－水（64:36）为流动相，流速为 　　1.0ml?min-1，柱温为室温，进样量为 10mu;l。结果：迷迭香酸在 63.04mu;g/ml～315.20mu;g/ml 范 　　围内线性关系良好，r=0.9993，平均回收率为 99.29 %，RSD=0.53%。结论：该法简便、快速、专属性好，结果准确、可靠。 　　【关键词】迷迭香酸；牛至肝康胶囊；高效液相色谱法 　　牛至肝康胶囊为广西强寿药业集团有限责任公司在研新药品种，由牛至、虎杖、 蓝花柴胡、 　　绞股蓝、柴胡、赭石、黄芪、陈皮、白术、甘草等十味中药组成，具有疏肝利胆，健脾益气，利湿解毒的作用，用于肝郁脾虚，湿毒内阻所致的急、慢性肝炎等。处方中的君药为牛至。牛至具有清热解毒、利水消肿之功效，临床上主要用于治疗痢疾、急慢性肠炎等疾患[1]。研究表明，牛至含有多种挥发油成分、乌索酸、鞣质、黄酮及黄酮甙、香豆素、聚酚等化合物[2]，且从其化学成分中可分离出迷迭香酸，含量较高，约为 8.13%-15.74%，可作为本品含量测定基准物进行研究，以保证新药牛至肝康胶囊的产品质量。 　　1仪器与试药 　　美国 Angilent 公司 1260 高效液相色谱仪；Agilent ZORBAX SB-C18 色谱柱，5mu;m，4.6 mmtimes;250mm。迷迭香酸对照品（中国药品生物制品检定所提供，批号：0840-201513）， 乙腈、甲醇为色谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。牛至肝康胶囊及缺牛至的阴性对照样品为广西强寿药业集团有限责任公司自制样品。 　　2方法与结果 　　2.1 色谱条件 色谱柱：Agilent C18（5mu;m，4.6 mmtimes;250mm）；流动相：乙腈－水（64:36）；流速为 1.0ml/min；检测波长：273nm，柱温为室温，流速 1.0ml?min-1。在上述色谱条件下，迷迭香酸与供试品中其它组分色谱峰达到基线分离，分离度良好，迷迭香酸峰理论塔板数不低于,3000，迷迭香酸及牛至肝康胶囊供试样品色谱图见图 1。 　　 　　2.2 对照品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的迷迭香酸对照品 15.76mg，用甲醇定容于 50ml 棕色容量瓶中，分别精密量取 2、4、5、6、8ml，定容于 10ml 棕色容量瓶中，制成一系列不同浓度的对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 取样品适量，研细，取 1.0g，精密称定，置 50ml 具塞锥形瓶中，加如甲醇 25ml，浸泡 30 分钟，超声处理（功率 400W，频率 40kHz）30 分钟，取出放冷，过滤，滤渣及滤器用甲醇适量洗涤 3 次，滤液及洗涤液置 50ml 棕色容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀， 0.45mu;m 微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。 　　2.4 线性关系考察 精密吸取以上不同浓度对照品溶液各 10mu;l 进样分析，以对照品溶液浓度（X，mu;g/ml）为横坐标，以峰面积积分值（Y）为纵坐标，绘制标准曲线，的迷迭香酸的回归方程为：y =7.4924x + 29.257（r=0.9993），结果表明，迷迭香酸在 63.04mu; g/ml～315.20mu;mg/ml 　　浓度范围内时，进样量 10mu;l 与迷迭香酸峰面积对数呈良好的线性关系。 　　 　　图 2迷迭香酸线性关系图 　　2.5 精密度实验 精密量取对照品溶液 10ul 注入液相色谱仪，重复进样 6 次，结果迷迭香酸峰面积 RSD 为 1.36%，表明精密度较好。 　　2.6 稳定性实验 取牛至肝康胶囊同一供试品溶液（批号 150203）在室温下放置，分别于 0、2、4、6、8、10、12、24h 进样 10ul，测定，结果供试品溶液迷迭香酸峰面积 RSD 为 1.65%，表明供试品溶液在 24 小时内基本稳定，峰面积没有在考察时间内呈现下降趋势。 　　2.7 重复性实验 精密称取牛至肝康胶囊细粉 6 份，按“供试品溶液的制备”项下方法制成供试品溶液，并在上述色谱条件下进样 10ul，测定迷迭香酸峰面积，计算含量。结果供试品中迷迭香酸含量的 RSD 值为 1.48%，表明实验方法的重复性较好。 　　2.8 回收率实验 分别精密称取 9 份已知含量的牛至肝康胶囊细粉约 0.5g，分别置于 50ml 具塞锥形瓶中。精密称取迷迭香酸对照品 30.02mg 置 50