HPLC法测定熄风通络胶囊中天麻素的含量.docVIP

精品论文 参考文献 HPLC法测定熄风通络胶囊中天麻素的含量 李星洁 　　（河南省安阳市中医院 河南 安阳 455000） 　　【摘要】 目的：建立HPLC法测定熄风通络胶囊中天麻素的含量。方法：色谱柱采用BDS HYPERSIL C18色谱柱(4.6times;25mm，5mu;m)，以乙腈-0.05%磷酸溶液（3:97）为流动相，检测波长为220nm。结果：天麻素进样量在0.05～1.25mu;g范围内呈良好的线性关系，平均回收率为99.8%，RSD=1.48%(n=5)。结论：该方法简便、准确、专属性强，可作为控制熄风通络胶囊质量的方法。 　　【关键词】 HPLC；熄风通络胶囊；天麻素；含量测定 　　【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2016）05-0391-02 　　熄风通络胶囊系安阳市中医院协定处方.参照《中国药典》2010年版一部“天麻”与“天舒胶囊”项下[含量测定]方法，采用高效液相色谱法建立含量测定的方法如下。 　　1.仪器与试药 　　1.1 仪器 　　SY-5100型高效液相色谱仪，BDS HYPERSIL C18色谱柱(4.6times;25mm，5mu;m)，ANASTAR色谱工作站（天津奥特赛恩斯仪器有限公司），赛多利斯BT125D分析天平，KQ-50B型超声波提取器。 　　1.2试药 　　天麻素对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110807-201306，供含量测定用）；熄风通络胶囊（安阳市中医院生产、提供，批号20120602；乙腈、磷酸（色谱纯）；乙醇（分析纯）；纯化水。 　　2.方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　色谱柱：BDS HYPERSIL C18色谱柱(4.6times;25mm，5mu;m)；流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液（3:97）；检测波长：220nm；进样量：10mu;l；流速：1.0ml/min；柱温：室温。按本品控制指标天麻素峰计算理论板数，应不得低于5000。 　　2.2 对照品溶液的制备 　　取天麻素对照品（批号：110807-201306）适量，精密称定，加乙腈-0.05%磷酸溶液（3:97）制成每1ml含50mu;g天麻素的溶液，即得。 　　2.3 供试品溶液的制备 　　取熄风通络胶囊（批号20粒内容物，研细，取约2g，精密称定，放入100ml具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，置水浴锅上加热回流3小时，放冷后，再次称定重量，加稀乙醇补至上次称定的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置水浴锅上浓缩至近干，残渣加乙腈-水（3:97）溶液溶解，转移至25ml量瓶中，用乙腈-水（3:97）混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 　　2.4 测定法 　　精密吸取对照品溶液10mu;l、供试品溶液10mu;l，注入液相色谱仪，测定，即得。 　　2.5 专属性考察 　　2.5.1阴性对照溶液的制备 按本制剂处方比例，制备缺天麻的阴性样品，按“2.3”项下方法制备阴性对照溶液。 　　2.5.2阴性对照试验 依照“2.3”项下色谱条件，精密吸取对照品溶液10mu;l、供试品溶液10mu;l、阴性对照溶液10mu;l，依次进样测定，在天麻素色谱峰相同保留时间处，熄风通络胶囊供试品有色谱峰出现，缺天麻的熄风通络胶囊阴性样品无色谱峰出现，表明阴性样品无干扰。 　　2.6 线性关系考察 　　取天麻素对照品溶液分别进样1mu;l、5mu;l、10mu;l、15mu;l、20mu;l、25mu;l，按拟定的色谱条件测定，以峰面积积分值（Y）为纵坐标，天麻素进样量（X）为横坐标，进行线性回归，得出回归方程以及线性范围。回归方程Y=2.59times;101X+844，r=0.9995，天麻素进样量在0.05～1.25mu;g范围内呈良好的线性关系。 　　2.7 精密度试验 　　精密吸取对照品溶液，重复进样5次，每次进样量10mu;l，测定天麻素峰面积，其RSD为0.66%(n=5)，表明仪器精密度良好。 　　2.8 重复性试验 　　精密称取熄风通络胶囊（批号内容物适量，按照“2.3”项下供试品溶液制备方法制备供试液，按“2.1”项下色谱条件分别测定，进行5次平行试验，以共有峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD为考察指标，结果相对保留时间的RSD=0.73%，相对峰面积RSD=2.63%(n=5)，表明该方法重复性良好[1]。 　　2.9 稳定性试验 　　取熄风通络胶囊（批号，按照“2.3”项下供试品溶液制备方法制备供试液，按“2.1”项