鸭病毒性肠炎病毒强毒在人工感染鸭体内形态结构和发生学的研究(1).pdfVIP

生垦童墼：鲎堕学会鹰萤学分会第十二次学术研讨会论文集 鸭病毒性肠炎病毒强毒在人工感染鸭体内形态结构和 发生学的研究 袁桂萍程安春” 汪铭书 周毅 刘菲 韩晓英 郭宇飞 廖永洪徐超 文明 贾仁勇 周伟光陈孝跃 4) (动物疫病与人类健康四川省重点实验室，IN川农业大学动物科技学院禽病防治研究中心，四川，雅安62501 Enteritis [摘要]为研究鸭病毒性肠炎病毒(Duck 应用透射电镜和超薄切片技术对人工感染DEV的成年鸭各组织器官进行观察。结果表明：感染后12h在脾脏和法氏囊首先观察到 少量的DEV出现，24h后在脾、胸腺和法氏囊以及死亡鸭的肝、肠和胰组织器官中均观察到具有典型的疱疹病毒粒子及其核衣壳 形态的DEV。DEV病毒核衣壳有空心型、致密核心型、双环型和内壁附有颗粒型四种形态，存在胞核和胞浆两种装配方式。病毒成 熟有两种方式：一为细胞核内核衣壳在核内获得皮层，通过核内膜获得囊膜成为成熟病毒；二为核内核衣壳通过内外棱膜进入胞 浆，核内和胞浆内的核衣壳在细胞浆中获得皮层，然后在各种质膜上获得囊膜，最后成熟病毒通过细胞破裂或其他方式释放到细胞 外。伴随着病毒的复制、装配和成熟，细胞中出现多种核内和胞浆包涵体、核内致密颗粒、核内微管和中空短管、胞浆包液体等病毒 相关结构。 [关键词]鸭病毒性肠炎病毒强毒{人工感染}病毒形态发生 Viral 鸭病毒性肠炎(Duck Enteritis，DVE)，俗称鸭瘟(Duck 禽类的一种急性败血性疱疹病毒感染，其造成的死亡、淘汰和产蛋下降给养鸭业带来巨大的经济损失““。应用电 镜技术对DEV的形态发生学‘““5“7’8’3研究已有零星报道，但多限于对弱毒的细胞培养和自然发病病例的研究， 缺乏系统性的人工感染强毒病例的病毒形态发生学的研究。本研究通过人工感染DEV强毒复制DVE急性病 例，对病毒的形态结构和病毒形态发生学以及在体内的分布情况进行研究。 1材料与方法 1．1鸭 健康2月龄北京鸭50只，未免疫接种，源于雅安无鸭病毒性肠炎感染史地区。 1．2DEV 为CH株强毒，对2—3月龄鸭最小致死量为10／ml，由四川农业大学禽病研究中心提供。 1．3人工感染 肌肉接种DEV 次，直至有鸭发生死亡时停止剖杀而采集死亡鸭组织器官，取其典型病变部位，观察记录发病及死亡情况。采集的 样品包括：心肌、肝脏、肾脏、脾脏、胸腺、法氏囊、胰腺、大脑、十二指肠。采取正常鸭组织作对照。 1．4超薄切片制备及电镜观察 定、包埋、切片，醋酸铀和柠檬酸铅染色，H～600型透射电镜观察并照相。 2结果 基金项目：四川杰出青年学科带头人基金后续资助项目(编号；03ZQ025—028) 作者简介：袁桂萍(1977一)，女，四川省新津县人，博士研究生，从事动物传染病研究工作。 226— 优秀论文 2．1病毒攻击的靶器官和靶细胞 加，在死亡鸭的肝脏、脾脏、十二指肠、法氏囊、胸腺发现数量极多的病毒存在，胰腺中仅发现少量细胞中有病毒的 存在，其它组织没有观察到病毒。受到感染的细胞主要有网状内皮细胞、巨噬细胞、淋巴细胞、肠上皮细胞、肠道平 滑肌细胞、纤维细胞、肝细胞、血管内皮细胞，其它如胰腺外分泌细胞、白细胞、浆细胞、外周血淋巴细胞中偶尔见 到病毒的存在。淋巴细胞中成熟病毒较少，往往在病毒成熟之前凋亡或坏死。而在网状内皮细胞、巨噬细胞、肠上 皮细胞、肠道平滑肌细胞、纤维细胞、肝细胞、血管内皮细胞常可见大量成熟病毒，在血管中偶尔可见游离的成熟 病毒。对照鸭组织中未发现病毒。 2．2病毒的形态特征 病毒核衣壳直径为42 环型，核衣壳内部有一致密或空心的环状结构；③内壁附有颗粒型，核衣壳的内壁附有1至5个不等的颗粒状的 结构，多为4或5个颗粒附着，使核衣壳的内部呈现透明的十字架形或五角星形。④致密核心型，这种核衣壳具有 电子致密的核心，核心的形状多变，有的近似圆形，有的呈棒状、哑铃形、蝌蚪形，极不规则，大小不