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- 2017-12-31 发布于江苏
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组合生物学
组合生物合成;一、组合生物合成简介;(一)、组合生物合成的概念;;(二)、组合生物合成的特点;二、组合生物合成法;(一)组合生物合成的基本程序:;【1】基因操作;1.PKSI型基因的组合操作;1)整个单元操作改变聚酮体链的长度:
PKSI中结构单个ORF可以单独表达,去掉特定的ORF可以改变链长。;2)替代LD改变生物合成起始单位:
LD区域是PKS基因簇的操作靶点,用异源LD域替代原LD域可以改变所接受的起始单元,获得新的聚酮体。;3)前体定向生物合成:
由新的前提介导生物合成称前体定向生合成。
4)AT域的互换 :
这一步是操作重点,不同AT域识别不同的延伸单位,所以相互代替或置换AT域可以产生新的化合物
;5)β-碳链延伸域修饰的操作:
形成产物的多样性
6)单元连接序列的操作
以上这些可以是单个单元的操作,也可是两个、三个单元分别改变后的组合操作。
;7)对聚酮体进行后修饰:
包括糖苷化与羟基化,修饰后才具有生物活性
8)体外表达系统:
现已发展了体外表达DERS蛋白系统
;2.PKSII型组合生物合成的基因操作 ;【3】组合生物合成的表达系统;【3】克隆生物合成的功能基因簇;三、组合生物合成中常用的 生物技术;1.抗性基
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