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四、分离纯化方法 1、硅胶柱层析法 主要用于分离极性较低的黄酮类物质如异黄酮、黄烷醇类和高度甲基化的黄酮和黄酮醇。分离前应先用浓盐酸除去供试硅胶中混存的微量金属离子。 * 生 物 碱 类 化 合 物 提 取 分 离 Ⅰ、 概 述 生物碱是指一类绝大多数具有显著活性的碱性、天然氮杂环化合物，但不包括氨基酸、蛋白质、核苷、卟啉、胆碱甲胺等开链的简单脂肪胺。它的氮原子常在环上。 生物碱广泛地分布在植物界，又称植物碱。表1。 一、结构与分类 生物碱的分类有三种分法，可按来源分、按化学结构分、按生源结合化学结构分。其中按化学结构分类在目前占主导地位，将具有同样骨架的生物碱归纳在一起，有利于结构的分析和研究。 按化学结构分类——根据生物碱具有的化学结构母核分类。 1、杂环衍生物类 异喹啉类生物碱、喹啉类生物碱、吡咯烷类生物碱、吲哚联啶类生物碱、哌啶和吡啶类生物碱、莨菪烷类生物碱、吲哚类生物碱 2、萜衍生物类 3、甾衍生物类 4、环肽生物碱类 5、有机胺类生物碱 二、生物碱的理化性质及检识 1、性质 除少数为液体（如烟碱、毒芹碱等），大都为结晶性物质，味苦，能溶于氯仿、丙酮、乙醇等有机溶剂中，不溶于碱水。酚性生物碱能溶于柯性碱溶液。 生物碱的碱性强弱有差别，一般能与无机酸或有机酸生成盐，大部分生物碱盐都能溶于水。但与某些特殊的酸生成的盐不溶于水，如无机酸中的硅钨酸和有机酸中的苦味酸。 2、生物碱的颜色反应 生物碱与不同的显色试剂反应，显示的颜色不同，可用来区别和判断生物碱。用于生物碱的显色试剂很多，常用试剂有： ⑴Mandelin试剂（1%钒酸胺的浓硫酸溶液）——阿托品显红色，奎宁显淡紫色，吗啡显蓝紫色，可待因显蓝色，土的宁显蓝紫色到红色。 ⑷Fornde试剂（1%钼酸钠或5%钼酸铵的浓硫酸溶液）——乌头碱显黄棕色，吗啡显紫杉转棕色，可待因显暗绿色至淡黄色，黄连素显棕绿色，秋水仙碱显黄色，阿托品、土的宁不显色。 三、常见的提取方法 ◆水提取法 ◆酸性水溶液提取法：碱性较弱不能直接溶于水的生物碱 ◆碱性水溶液提取法：化学结构独特、化学性质与一般生物碱不同，且在酸性或中性条件下不稳定的生物碱。 ◆有机溶剂提取法：常用的是乙醇，相似相溶原理。可采用单一有机溶剂或混合溶剂提取。 四、分离和纯化 分离方法有很多， 经典方法：如溶剂萃取法、蒸馏法、沉淀法、盐析法、结晶法等； 较为现代、先进的分离方法：色谱分离法 实例一：长春花 　　【拉丁名】Herba Catharanthi rosei 　　【类别】全草类 　　【异名】雁来红、日日新，四时春、三万花　　【来源】为夹竹桃科植物长春花的全草。　　【采集】全年可采，晒干或鲜用。　　【化学成份】含70种以上生物碱，主要有长春碱、长春新碱、阿马里新等。 　 【性味归经】微苦，凉入肝、肾二经。　 【功用主治】 ①广州部队《常用中草药手册》：“镇静安神，平肝降压。治高血压。”　 ②《常用中草药彩色图谱》：“治疗何杰金氏病、恶性肿瘤。” 　③《广西药植名录》：“治白血病，肺癌，绒毛膜上皮癌，淋巴肿瘤。” 1、长春碱和长春新碱的提取分离方法之一 实例二：黄连 毛茛科多年生草本植物。 【功能主治】清热燥湿，泻火解毒。用于湿热痞满，呕吐吞酸，泻痢心烦不寐，血热吐衄，目赤，牙痛，消渴，痈肿疔疮；外治湿疹，湿疮，耳道流脓。 化学成分主含小檗碱，还含黄连碱、甲基黄连碱等。 1、盐酸小檗碱的提取分离 2、小檗碱、甲基黄连碱的提取分离 实例三：麻黄 1、提取分离方法一 2、提取分离方法二 黄 酮 类 化 合 物 提 取 分 离 黄酮类化合物广泛存在于植物界，（如，大蓟、车前子、陈皮、苦参、金银花、野菊花、甘草、红花等等都含有黄酮类化合物成分）是一类重要的天然有机化合物。常以游离态或与糖结合成苷的形式存在。 黄酮类化合物生理活性多种多样，据不完全统计， ①对心血管系统的作用；②抗肝脏毒作用； ③抗炎作用； ④雌性激素样作用； ⑤抗菌及抗病毒作用； ③泻下作用。 截止到1974年，国内外报道发现的黄酮类化合物共1674个（主要是天然黄酮类，也有少部分为合成品，其中苷元902个，苷722个），并以黄酮醇类最多；约占总数的三分之一，其次为黄酮类，占总数的四分之一以上，其余则较少。至于双黄酮类多局限分布于裸子植物，尤