超声波对生物大分子盐析的作用研讨.pdf

C011 超声波对生物大分子盐析的作用研究 陈腊梅 韩萍芳 吕效平 （南京工业大学理学院，江苏 南京，210009 ） 摘 要 在蛋白质－水胶体溶液中加入无机盐，利用蛋白质盐析的原理分离蛋白质。本文研究了 不同频率超声波对蛋白质盐析的影响，研究证明超声技术可加速盐析速度。 关键词 蛋白质 盐析 超声 频率 STUDY ON THE ULTRASONIC EFFECT ON PROTEIN SALTING-OUT LAMEI CHEN (College of Life Science and Pharmacy, Nanjing University of Technology, Nanjing Jiangsu 210009) Abstract According to the principle on salting-out of protein solution, add inorganic saline and make the protein precipitate. The text studied the effect on protein under different frequency, and find that ultrasonic technology can improve salting-out rate. Key words protein, salting-out, requency, ultrasound 一、前言 超声波由于具有波长短，能量集中的特点，在各行各业中有广泛的用途，如用于清洗、 测量、医疗诊断、促进化学反应等，超声波的应用越来越受到重视。超声波应用于生物技术 是一个比较新的研究领域。 超声在物质介质中的相互作用机制可分为加热作用、空化作用及机械传质作用，其作用 的强弱与超声波的频率和声强有关。超声波在化学和化工过程中的应用，主要是利用超声空 化时产生的机械效应和化学效应，前者主要表现在非均相反应界面的增大，反应界面的更新 以及涡流效应产生的传质和传热过程强化，后者主要是由于在空化气泡内的高温分解、化学 键断裂、自由基的产生及相关反应。利用机械效应的过程包括萃取、吸附、结晶、乳化与破 乳、膜过程、超声阻垢、电化学、非均相化学反应、过虑、悬浮分离、传热以及超声清洗等。 利用化学效应的过程主要包括有机物降解，促进无极、有机和有机金属合成，聚合物的聚合、 解聚和共聚及其它自由基反应。实际上，在一个具体过程中往往是两种效应都起作用[1] 。超 声波除了在化学反应方面有重大的应用外，在促进传质方面也有很多应用。应用不同频率、 声强的超声波，可以强化不同过程的萃取。郭孝武[2]等用不同频率超声提取芸香甙成分，发 现超声频率 20KHz ，超声辐照 30 分钟时得到最好的收率，而且比改进的热硷提取－酸沉淀 法的收率高。郭孝武[3]等用超声提高益母草总碱提出率，超声法优于回流法，当超声处理 40min ，比回流法的提出率高41% 。Nirupam Pal 等采用超声波在一些的逆流萃取，结果将工 业废木料中 99% 以上的致癌物五氯苯酚除去，该研究结果具有相当的工业意义，仅美国每 1 [4] 年至少就有 45 亿立方米含五氯苯酚的废木料需要处理 。 一般来说，所有的固体溶质都可以在溶液中加入中性盐而沉淀析出，这一过程称为盐析。 在生化制备中，许多物质都可以用盐析法进行沉淀分离，如蛋白质，多肽，多糖，核酸等， 但盐析法应用最广的还是在蛋白质领域。对水溶性的蛋白质来说，它的水溶液是亲水性胶体。 蛋白质之所以能悬溶于水中，形成稳定的胶体溶液，与其分子状态有关。蛋白质分子表面带 有亲水性基团，它们很容易进行水合作用，并在表面形成一层水化层，从而使它们能顺利的 进入水溶液中。另外，如果溶液的 pH 值偏离于等电点，所有分子都带有相同的电荷，又会 进一步增进它们的分散能力。因此，凡是能破坏蛋白质分子水化作用或者减弱分子间同性相 斥作用的因子，都有可能降低蛋白质在水中的溶解度，而使它沉淀下来。超声波的机械传质 作用是超声波在介质中传播时，可使介质质点进入振