蝎毒耐热蛋白降低难治性癫痫大鼠癫痫发作敏感性.docVIP

精品论文 参考文献 蝎毒耐热蛋白降低难治性癫痫大鼠癫痫发作敏感性 刘贵安 时晶 (辽宁丹东市中心医院神经内科 118002) 【摘要】本研究的目的是探讨蝎毒耐热蛋白（SVHRP）降低难治性癫痫大鼠癫痫发作敏感性的机制。实验分三组：（1）盐水对照组（NS+NS）：SD大鼠予颈部皮下注射生理盐水后，腹腔注射生理盐水，连续10天。(2) 实验组 (SE+NS)：SD大鼠诱发癫痫持续状态(SE)后，腹腔注射生理盐水，连续10天。（3）实验给药组（SE+SVHRP）：SD大鼠诱发癫痫持续状态（SE）后，腹腔注射蝎毒耐热蛋白（SVHRP），连续10天。行为学和免疫组化结果：行为学结果：用阈下剂量(5mg/kg)KA检测动物对癫痫刺激的敏感性。实验组（SE+NS）大鼠均出现对癫痫剌激的敏感性增强，而实验给药组的有2只大鼠对癫痫剌激的敏感性增强，盐水对照组20只大鼠未出现对癫痫刺激敏感性增强。免疫组化结果：实验组前深梨状皮层T区ChAT 免疫反应阳性的Ach能神经元神经元数目明显少于实验给药组、盐水对照组,而实验给药组和盐水对照组大鼠前深梨状皮层T区的ChAT免疫反应呈阳性神经元神经元数目无明显区别。行为学及免疫组化结果表明：KA（海人酸）诱发SE后慢性癫痫动物对阈下癫痫剌激的敏感性进行性增强。蝎毒耐热蛋白（SVHRP）能明显降低难治性癫痫大鼠癫痫发作敏感性,这很可能与其能减少难治性癫痫大鼠的前深梨状皮层T区胆碱能神经元的变性脱失有关。 【中图分类号】R95【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）30-0114-02 癫痫（Epilepsy,EP）是由先天或后天不同病因所引起的慢性脑部疾病，是神经系统常见变性疾病之一，人类癫痫发病机理及药物筛选仍主要采用癫痫动物模型进行。可用电的或化学的方法诱发正常动物出现各种类型的急性癫痫发作,其中某些类型的急性发作出现癫痫持续状态(statusepilepticus,SE),日后,该动物易出现进行性提高对癫痫剌激的敏感性。本实验将SD大鼠皮下注射SK,诱发SD大鼠癫痫持续状态(SE)，10天后,用阈下剂量(5mg/kg)KA检测动物对癫痫刺激的敏感性。实验组（SE+NS）大鼠均出现对癫痫剌激的敏感性增强，而实验给药组的有2只大鼠对癫痫剌激的敏感性增强，盐水对照组20只大鼠未出现对癫痫刺激敏感性增强。同时利用免疫细胞化学染色，检测到SE大鼠的前深梨状皮层T区的ChAT免疫反应呈阳性神经元神经元数目明显减少。乙酰胆碱(Ach)是.脑内重要的神经递质对癫痫形成,癫痫发作,癫痫防治都有重要的调节作用[1]。梨状皮层结构和功能上与癫痫有密切关系，前深梨状皮层T区很可能是颞叶癫痫的始动部位示癫痫敏感动物梨状皮层T区硬化很可能是癫痫发作敏感性长期增强的重要原因之一。SE后慢性癫痫动物对阈下癫痫剌激的敏感性进行性增强前深梨状皮层T区胆碱能神经元的变性脱失有关。大全蝎是历代中医用来治疗惊厥、癫痫的首选药物。本实验发现蝎毒中的耐热蛋白,即蝎毒耐热蛋白（SVHRP）可以明显降低难治性癫痫大鼠癫痫发作敏感性,同时发现蝎毒耐热蛋白（SVHRP）可以减少SE大鼠的前深梨状皮层T区的ChAT免疫反应呈阳性神经元缺失。故本实验结果为深入探讨难治性癫痫动物对阈下癫痫剌激的敏感性进行性增强发病机制提供新的理论依据，并为临床更为广泛应用SVHRP治疗提供实验支持。 材料与方法 KA诱发癫痫持续状态之后,动物处理与分组 健康雄性Sprague-Dawley (SD) 大鼠（大连医科大学实验动物中心提供）一次颈部皮下注射剂量为10mg/kg的KA诱发大鼠出现急性癫痫发作并最后发展成癫痫持续状态(status epilepticus,SE)。SE后,将该动物(n=40)随机分为两组(1) 实验组 (SE+NS)：经腹腔注射生理盐水和（2）实验给药组（SE+SVHRP）：经腹腔注射SVHRP,连续10天。同时, 建立盐水对照组(即NS+NS)：即给予颈部皮下注射等容积(2.0ml/kg)的生理盐水的动物(20只)并经腹腔注射生理盐水连续10天。10天后,各组动物均被给于阈下剂量(5mg/kg)的KA检测该动物是否出现进行性提高的对癫痫剌激的敏感性。 红藻氨酸（KA）：美国Sigma。蝎毒耐热蛋白由大连医科大学中试基地提供。 结果 1.慢性难治性癫痫动物模型对癫痫刺激的敏感性SE动物模型日后(大约1周)可出现进行性提高对癫痫剌激的敏感性并表现为长期,反复,自发出现癫痫发作,即发展成慢性难治性癫痫癫痫动模[2] 。往往慢性难治性癫痫动物对癫痫刺激的敏感性增强，本实验将癫痫持续状态后的SE大鼠分成实验组 (SE+N