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药用植物中活性成分的高效液相色谱分析研究进展
药用植物中活性成分的高效液相色谱分析研究进展;一、高效液相色谱法 HPLC (High Performance Liquid Chromatography) ;2、HPLC与GC差别;(2) .流动相的区别
GC:
流动相为惰性,气体组分与流动相无亲合作用力,只 与固定相有相互作用。
HPLC:
流动相为液体,流动相与组分间有亲合作用力,能 提高柱的选择性、改善分离度,对分离起正向作用。且流动相种类较多,选择余地广,改变流动相极性和pH值也对分离起到调控作用,当选用不同比例的两种或两种以上液体作为流动相也可以增大分离选择性。
(3).操作条件差别
GC:加温操作
HPLC:室温;高压(液体粘度大,峰展宽小);二、高效液相色谱仪;1.高压输液系统(泵)
恒压泵:在一定操作条件下,输出压力保持恒定,流量随系统压力变化而变化。
恒流泵:在一定操作条件下,输出流量保持恒定,而与系统的压力无关。
2.进样系统
a 、隔膜进样(高分子有机硅胶垫→进样室)
GC: 系统压力较小
HPLC: 系统压力太大,须停泵进样(早期)
b、 阀进样:不必停泵,六通阀
; 三、高效液相色谱技术的发展;1、固定相的研究进展 ;2、流动相的研究进展; Mccailey研究了有机溶剂强度对一些基本化合物的影响,发现四氢呋喃和甲醇比乙腈做流动相有更好的色谱峰,尽管不同溶质的行为有相当大的差异 Tadashi等通过对大量药物的测定讨论了乙腈和磷酸盐缓冲液配比的变化对反相色谱保留值的影响。付春梅等用乙醇一水系统作为反相色谱流动相分析了大量中药有效成分,并与甲醇-水和乙腈-水系统进行了比较,认为在合适的柱温等色谱条件下,乙睛流动相系统安全、准确。石国荣利用反相色谱中容量因子与二元流动相中强溶剂的体积分数基本成线性的关系,引入半峰宽数据,提出了用图解法选择二元流动相配比的方法。;3、检测器的研究进展; 四、高效液相色谱在中草药研究中的应用 ;2、在方剂配伍研究中的应用 ;3、在制剂工艺研究中的应用;4、在作用机理研究中的应用 ;5、在定性、定量分析中的应用 ;6、在药代动力???研究中的应用 ; 绿原酸的平均回收率为87.59%。该方法可成功地用于银黄颗粒中绿原酸的药代动力学研究.L.J等建立了一种快速的反相高效液相色谱法测定大鼠丘脑中黄琴昔的新方法。采用Hypersil-C18柱,4-硝基-苯甲酸为内标物,流动相为甲醇-水-磷酸(45:55:0.2,v/v/v),检测波277nm,黄芩苷的线性范围为 0.05-4.0mug/mL,检出限10ng/mL。在对雄性健康大鼠静脉注射单一剂量90毫克/千克黄芩苷的黄芩提取物后,采用该法测定黄芩苷在大鼠丘脑中随时间的变化曲线,结果令人满意。;五、研究结论;六、展望;
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