抗生素生产的碳源调控.pptVIP

抗生素生产的 碳源调控; 一、概述 二、碳源的调控 （一）、革兰氏阴性菌中抗生素产生的碳源调控  （二）、革兰氏阳性菌中抗生素产生的碳源调控 三、总结; 一、概述;2、抗生素合成的影响因素 抗生素是生物次级代谢所产生的小分子物质，对有机体的生长不重要，但是对人的健康非常重要，通常在微生物生长繁殖的后期阶段产生，它们的合成受培养基中营养物质的组成和浓度影响，在持续的工业生产研究中可以看出碳源是其中最主要的影响因素，有研究指出葡萄糖和其他糖类物质影响其合成。所以目前为止，不仅从发酵而且从生化和分子生物学角度对碳源对抗生素产生的影响进行了研究。 ;3、细胞生长期和抗生素生产期的相互关系;4、碳源影响抗生素生物合成中起到关键作用的一些蛋白质、作用因子及系统 （1）、磷酸烯醇式丙酮酸 ：磷酸转移酶系统（PTS）是其中最重要的一个机制，在低鸟嘌呤和胞嘧啶（GC）含量的革兰氏阴性菌和阳性菌中都有运用。 （2）、CarI （作用于N-3-(oxohexanoyl)-L-homoserine lactone (OHHL) 的合成）用于欧文氏菌属中的一个关键因子。 ;（3）、 Bld和Reg1：链霉菌中的转录调控因子 （4）、链霉菌属中其他的Bld蛋白质（如 BldA, BldG,BldH） （5）、链霉菌属中的Glk酶 （6）、SCO2127蛋白，在链霉菌属中推动CCR（碳分解代谢阻遏机制）中代谢信号的产生。 ;（7）、cAMP和它的结合蛋白（cAMP受体蛋白（CRP））：对革兰氏阴性菌和一些链霉菌属细菌的合成有重要作用。 （8）、真菌中的CreA锌指受体 （9）、细菌中结合于cre基因上的代谢调控蛋白A（CcpA） ;二、碳源的调控; 在细菌和其他微生物生长中葡萄糖通常作为首选的碳源,但会干扰许多抗生素的产生。在混合碳源中有速效碳源和非速效碳源之分，前者常用作细胞繁殖很少用于抗生素合成，在速效碳源耗尽后，非速效碳源被用于合成抗生素。 碳源的调控取决于优势碳源的利用率，次级代谢的一个显著特点是与微生物的低生长水平相关的，在培养基中抑制碳源使其处于一个低浓度可以产生一个低生长率并且可以消除生物合成抗生素过程中的一些干扰。; 在微生物中解释碳代谢在次级代谢生产中的影响时有不同的描述机制，这些机制在不同种类的微生物中表现出重要的不同，关于这些机制的详细描述可以进一步参考一些著作，在这里主要强调的是碳分解代谢物阻遏机制（在DNA转录水平抑制合成的机制）的一些研究。 碳分解代谢物阻遏(carbon catabolite repression, CCR)是指微生物在混合碳源发酵时优先利用速效碳源(通常为葡萄糖)，且该碳源的代谢产物会抑制其他非速效碳源代谢相关的基因表达和蛋白活性，从而影响非速效碳源利用的现象。 ;（一）、革兰氏阴性菌中抗生素产生的碳源调控;革兰氏阴性菌中的CCR机制; 类特异性。酶Ⅱ在结构域水平 非常保守, 一般包含３个结构域(EII A、EIIB 和EIIC), EIIA 和EIIB 为亲水性磷酸转移酶结构域, 朝向胞内, EIIC一般为疏水性膜结合通道形成结构域。大肠杆菌葡萄糖 PTS 的EIIGlc由可溶性的EIIAGlc和结合在质膜上的转运蛋白EIICBGlc两个蛋白组成。当细胞外富含葡萄糖碳源时, 细胞内的磷酸烯醇式丙酮酸(PEP） 为磷酸基团的供体, 经EI—HPr—EIIAGlc—EIIBGlc途径传递磷酸,磷酸化的EIIBGlc（EIIBGlc—P）激活EIICGlc，EIICGlc特异识别葡萄糖, 将其转运进细胞, 并同时将其磷酸化为葡萄糖-6-磷酸。 ;图：大肠杆菌中碳分解代谢的阻遏机制模式图;假单胞菌;与Crc\Crz相关的分解代谢物阻遏模式;（二）、革兰氏阳性菌中抗生素产生的碳源调控;以芽孢杆菌目为例; 事实上，有4–5%的枯草芽孢杆菌用于抗生素的生产。在这一方面，已有报道几乎有高达8.5%的与植物相关联的解淀粉芽孢杆菌FZB42用于抗生素生产。;低GC含量的革兰氏阳性菌（枯草芽孢杆菌）中的CCR机制; 相关研究表明，在大多数情况下CcpA与cre 位点的结合需要共阻遏蛋白P-(Ser)-HPr 的参与，HPr（组氨酸磷酰蛋白质）