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1株产碱性木聚糖酶的芽胞杆菌的分离鉴定及其相关研究 畜牧与兽医2006年第38卷第9期 1株产碱性木聚糖酶的芽胞杆菌的分离鉴定 及其相关研究 曹要玲,白晓婷,刘辉.,李旺一,杨明明.,,龚月生 (1.西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌712100;2,武汉阳光广济医药开发有限公司.湖北武汉430062) 摘要:分离到1株产碱性木聚糖酶的革兰氏阳性菌株,通过菌落形态及16srDNA序列同源性分析.确定该菌株为短小芽孢杆菌.生长条件和产 酶条件研究结果显示,最适温度和pH分别为50和pH8.0.培养基优化试验显示在有机和无机混合氮源条件F(NH4NOj0. 57%;牛肉膏1%; 蛋白胨0,5%;酵母提取物0.5%;木聚糖0,5%)木聚糖酶产量达到最高(180U/mL).酶学试验表明最适反应条件为50oC,pH8—9;在pH9 的条件下,孵育120min时仍具有75%的活力,表明该酶具有较强的碱耐受性. 关键词:碱性芽孢杆菌;木聚糖酶;16srDNA 中图分类号:$852.61文献标识码:A文章编号:0529.5130(2006)09.0011.04 Isolationandidentificationofanalkali—tolerateBacillussp.strain producingxylanase CAOYa.-ling,BAIXiao?ting,LIUHui,LIWang,,YANGMing.ming,GONGYuesheng (1.CollegeofAnimalSciences,NorthwestAamp;FUniversity,Yangling712100,China; 2.Yangguang?Guan~iMedicalRamp;DCo.Ltd,Wuhan430062,China) Abstract:Analkali-tolerateBacillussp.strainwasisolatedforproducingalkali.toleratexylanase.Thestrainwasidentiedasonestmin0f Bacilluspumilusthrough16SrDNAsequencinganalysis.ThexylanasefromthestrainhadaoptimalactivityatpH8.0and55℃.Thexyla. naseexhibitedwellalkali-tolerate,retaining75%activitiesafter120raintreatedwithinpH9.0.Themaximumproductionofthealkali. 收稿l=I期:200605—19 作者简介:曹要玲(1981.),女,硕士研究生. 通讯作者. 参考文献 [7] [8] 李心治,章银梅,抗氧化型枯草杆菌碱性蛋白酶高产工程菌的 构建及其酶学特性[J].高技术通讯.2000,10(10):13-18 刘成君,黄庆.大肠杆菌.枯草杆菌穿梭质粒载体pSuGv4的 构建[J],四川大学(自科版),2001,38(2):243.246. 彭清忠,张睢材,枯草杆菌表达系统的研究进展.生物技术通 讯,20Ol,12(3):220—225. 吴青,罗进贤,枯草杆菌诱导型高效表达.分泌系统的构建 [J].自然科学进展,20Ol,11(1):40.46. 尹清强,韩彪,郑秋红.等,枯草杆菌的淀粉酶基因在大肠 杆菌中的表达[J].畜牧与兽医,2005.37(6):7-9. Arvanitis,Nikolaos;Pappas.eta1.CharacterizationandReplication PropertiesoftheZymomonasmobilisATCC10988PlasmidspZMO1 andpZMO2[J],Plasmid,2000,44:127.137, SolarG,EspinosaM.Plasmidcopynumbecontrol:anever—growing story[J].MolMicmbiol,2000,37(3):492.500 Oekel,Sascha,Eppelmann,eta1.Heterologousexpressionofnonri— bosomalpeptidesynthetasesinBsubtilis:constructionofabi.func. [9] [10] [12] [13] [14] tionalB.subtilis/E,colishuttlevectorsystem[J],FEMSMicmbiol— ogyLetters,2002,216(2):185—191 Oseph,Pascale,Fantino,etal,Rapidorientated