植物生理学实验课件精品.ppt

过氧化物酶活性的测定 实验器材与试剂 实验仪器 分光光度计，离心机，天平，研钵 实验试剂 愈创木酚，30% 过氧化氢，20 mmol/L KH2PO4，100 mmol/L 磷酸缓冲液（pH6.0），反应混合液 [ 100 mmol/L 磷酸缓冲液（pH6.0）50 mL，加入愈创木酚28μL，加热搅拌至愈创木酚溶解，冷却后加入 30% 过氧化氢 19μL，混合均匀，保存于冰箱中 ] 实验材料 马铃薯块茎 过氧化物酶活性的测定 实验步骤 粗酶液的提取 称取去皮马铃薯块茎 1 g，加 20 mmol/L KH2PO4 5 mL，于研钵中研磨成均浆，以 4000 r/min 离心 15 min，收集上清液保存于冷处，所得残渣在用 5 mL KH2PO4 溶液提取一次，合并两次上清液。 酶活性的测定 取比色杯 2 只，于一只中加入反应混合液 3 mL， KH2PO4 1mL，作为校零对照，另一只中加入反应混合液 3 mL，上述酶液 1 mL，立即于分光光度计 470 nm 测量 OD 值，每隔 1 min 读数一次。以每分钟 OD 变化值表示酶活性大小。 过氧化物酶活性的测定 实验结果 ΔOD470/min·鲜重g = 次数 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 OD470 种子活力的快速测定 （氯化三苯基四氮唑法，TTC法） 实验原理 凡有生命力的种子胚部，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生命活力的种胚则无此反应。当 TTC 渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（ NADH 或 NADPH ）上的氢还原时，便由无色 TTC 变为红色的 TTF。 种子活力的快速测定 （氯化三苯基四氮唑法，TTC法） 实验器材与试剂 实验仪器 恒温箱，烧杯，培养皿，镊子，刀片 实验试剂 0.5% TTC 溶液 实验材料 大麦、小麦、籼谷或粳谷的种子 种子活力的快速测定 （氯化三苯基四氮唑法，TTC法） 实验步骤 浸种 将待测种子在 30～35 ℃ 温水中浸种，以增强种胚的呼吸强度。 显色 取吸胀种子 100 粒，，用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于培养皿中，加入适量的 0.5 % TTC 溶液覆盖种子。然后置于 30 ℃ 恒温箱中 1 h。观察结果。 将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚，作同样染色处理，作为对照观察。 种子活力的快速测定 （氯化三苯基四氮唑法，TTC法） 实验步骤 计算活种子的百分数。 实验结果 煮沸杀死的种子胚部均为白色。 未煮沸杀死的种子胚部大部分为红色，少数为白色。 活种子的百分率为： 种子活力的快速测定 （红墨水法） 实验原理 凡活细胞的原生质膜具有选择性吸收物质的能力，而死的种子胚细胞原生质膜丧失这种能力，于是染料便能进入死细胞而染色。 种子活力的快速测定 （红墨水法） 实验器材与试剂 实验仪器 恒温箱，烧杯，培养皿，镊子，刀片 实验试剂 5 % 红墨水 实验材料 大麦、小麦、籼谷或粳谷的种子 种子活力的快速测定 （红墨水法） 实验步骤 浸种 将待测种子在 30～35 ℃ 温水中浸种，以增强种胚的呼吸强度。 显色 取吸胀种子 100 粒，用刀片沿种子胚的中心线纵切为两半，将其中的一半置于培养皿中，加入 5 % 红墨水淹没种子。染色 10～15 min。 倒去红墨水，用水冲洗种子，至冲洗液无色，观察结果。 种子活力的快速测定 （红墨水法） 实验步骤 将另一半在沸水中煮 5 min 杀死胚，作同样染色处理，作为对照观察。 计算活种子的百分数。 实验结果 煮沸杀死的种子胚与胚乳均染上红色。 未煮沸杀死的种子胚部大部分为白色或浅红色，少数为红色。 活种子的百分率为： 植物生长调节剂对植物插条不定根发生的影响 实验原理 用植物生长调节剂（生长素类）处理插条，可以促进细胞恢复分裂能力，诱导根原基发生，促进不定根的生长。 植物生长调节剂对植物插条不定根发生的影响 实验器材与试剂 实验仪器 电子天平，烧杯，移液管，量筒等 实验试剂 1000 mg/L 吲哚乙酸溶液 实验材料 各种植物材料 植物生长调节剂对植物插条不定根发生的影响 实验步骤 用 1000 mg/L 吲哚乙酸溶液配制 100 mg/L、 200 mg/L、 300 mg/L 吲哚乙酸溶液。 从室外取植物材料，自茎顶端或枝条上端向下10～15 cm 处剪去植物下部分，去除花，保留1～2 片叶片（如叶面积较大，可保留半张叶）。 植物生长调节剂对植物插条不定根发生的影响 实验步骤 将插枝基部 2～3 cm 浸泡在吲哚乙酸溶液中（每种溶液中浸 5 枝），并以蒸馏水作对照，8 h 后取出枝条，插入砂质苗床中培养，注意控制温度和湿度。 20 d 后，统计各处理枝条不定根发生的数目，观察根的粗细和长度，以了解不同浓度吲哚乙酸在一定处