产酸芽孢杆菌的筛选及鉴定.docVIP

产酸芽孢杆菌的筛选及鉴定 J.SHANXlAGRIC.UNIV.(NaturalSciemPEdition) 雹-目I譬I豳f自然科学忻)2O08.28(1 产酸芽孢杆菌的筛选及鉴定 刘敏,张丽香,牛天贵 (中国农业大学食品科学与营养工程学院.北京100083) 摘要:旨在筛选可应用于发酵食品的快速产酸芽孢杆菌,从奉皖实验室保存的300株芽孢杆菌中.以加有溴甲酚 紫指示剂的培养基.筛选出在2h内变色的快速产酸菌株9株.将其在37C下140r?min摇床培养24h,筛选出 pH值低,活菌数高的菌株I,1.从形态,生理生化反应,全细胞蛋白电泳以及16SrDNA序列比对方面进行分析, 最终确定I一1菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilks). 关键词:枯草芽孢杆菌;鉴定;产酸;发酵食品 中图分类号:Q939.124文献标识码:A文章编号2008)0l-0026—04 ScreeningandIdentificationofBacillusspp.thatProduceAcid LIUMinetaI. (CollegeofFoodS(.1ent’eamp;NutritionalEngineering.ChinaAgriculturalUniversity.BeOing.100083) Abstract:ThestudyiscarriedoutonBmilltlsspp.producingacidfastthatcanapplyinthefoodfermentation.From 300Batillusspp.strainsstoredinthelab.9stainsproducingacidfastwerescreened.Theychangecolorinthemedi— umwithbromocresolpurpleintwohours.After24hcultureontheconditionof37Cand140rpm.L-1strainwas screenedbecauseithadlowpHandlargecolonycount.Withtheanalysisofcolonymorphology,physiologicalandbio— chemistryexperiments.cellproteinSDSand16SrDNAgenesequence,thestrainL-1wasidentifiedasBacillus subtilis. Keywords:Bacillussubtilis;1dentification;Produceacid;Fermentedfood 产酸菌在发酵食品中应用广泛,醋酸菌是生 产食醋的主要菌种,丙酸菌在干酪成熟中发挥着 独特的作用,乳酸菌用于发酵乳制品,肉制品及 蔬菜制品的生产.这些产酸菌在发酵过程中产生 的有机酸不但能抑制有害微生物的生长,而且对 发酵食品的风味产生重要作用.近年来,有关芽 孢杆菌产酸的报道很多,研究较多的是同型乳酸 发酵的凝结芽孢杆菌(Bacilluscoagulans).该 菌可作为乳酸的工业生产菌株,具有原料来源广 泛,生产成本低,产品光学纯度高和安全性好等 优点;可以治疗各种肠道疾病[;添加到饲料 中可以促进动物生长和提高饲料转化率[4;还可 用作水质净化剂l_5].关于该菌在食品中应用的报 道较少,主要集中在发酵蔬菜制品方面.赵大 云l_6研究了接种coagulans低盐腌渍雪里蕻的腌 渍效果,结果显示,接种coagulans进行腌渍, 可使盐分添加量由传统方法的8～lo降低至 5,腌菜卤汁中的氨基酸态氮和游离氨基酸明 显高于其它样品组,形成的亚硝酸盐含量最低, 成品质量最好,与其它样品有显着差别.本文对 自己分离出的产酸芽孢杆菌进行了筛选与鉴定, 旨在筛选出可用于发酵食品的具有快速产酸能力 的优质菌种. l材料与方法 1.1培养基 (1)筛选培养基:葡萄糖6g,酵母膏lg, 蛋白胨lg,MgSO0.05g,CCO3lg,溴甲酚 紫溶液3～4滴,琼脂l5～20g,蒸馏水l000 mI,pH72～7.4,l2l℃蒸汽灭菌20min. (2)种子培养基:葡萄糖6g,酵母膏lg, 蛋白胨lg,MgSO0.05g,CaCOslg,蒸馏水 收稿日期:2007—05l5修回日期:2007—07—02 作者简介:刘敏(1983一),女(汉).山西太谷人.硕士.主要从事食品微生物方面的研究. 通讯作者:牛天贵,男,教授,博士,Tel:010E—mail:niutiangui@l63.corn 28(1)刘敏等:产酸芽孢杆菌的筛选及鉴定27 1000mI,pH7.2～7.4,121C蒸汽灭菌20rain. (3)发酵培养基:葡