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脊髓损伤后骨代谢形态改变的髂骨形态计量学分析 作者：李全义，刘时璋，罗振群，弓 立群，王茁，马战胜，徐洪海，凌鸣 【摘要】目的：观察和分析脊髓损伤引起骨质疏松患者骨组织形态计量学（骨 结构与骨转换）参数特征，进一步探明发生骨质疏松的机制. 方法：选择脊髓 损伤截瘫患者30 （男19，女11）例；颈脊髓伤16 例，胸脊髓损伤14 例. 伤 后24 h 内取髂骨标本设为对照组，伤后1，6，12 mo 取髂骨标本设为实验组. 每位患者均采用自制微创活检器于同一部位获取2 cm 长的髂骨组织，进行骨组 织形态计量学观察与分析. 结果：实验组患者髂骨结构参数中骨小梁密度 （Tb.N），骨小梁厚度（Tb.Th），结点末端比（NTR）均低于对照组 （P0.05），而骨小梁间距（Tb.Sp）则高于对照组（P0.05）；骨转换参数中 平均类骨质宽度（Os.Th），类骨质体积（OV/BV），平均骨壁厚度（W.Th）均 较对照组低，其中两组间比较骨壁厚度（W.Th）差异有统计学意义（P0.05）； 骨吸收表面（ES/BS）则高于对照组. 结论：脊髓损伤后患者由于神经功能缺失 和废用因素，引起骨转换出现特异性改变，呈高转换率状态，骨形成与骨吸收 严重失衡，导致髂骨代谢显微结构发生明显退变，骨组织力学性能下降，是发 生骨质疏松的重要因素. 【关键词】脊髓损伤；骨和骨组织/代谢；骨组织形态计量学 0 引言 脊髓损伤(spinal cord injury， SCI)后，大鼠骨代谢发生改变，骨吸收 明显增强，损伤平面以下骨密度（BMD）降低，叶超群等［1］研究认为，脊髓 损伤后6 mo，骨量骨结构和生物力学性能均已发生疏松改变，原因是破骨吸收 增强所致. 为探讨脊髓损伤截瘫患者损伤平面以下骨代谢改变的特点，我们选 择脊髓损伤截瘫患者30 例，通过1，6，12 mo 不同时期的髂骨形态计量学研究 与分析，了解脊髓损伤继发骨质疏松在骨显微结构改变上的特点，探讨骨质疏 松发生的机制和特征. 1 对象和方法 1.1 对象选择 2000 ／2006 收治的脊髓损伤截瘫患者30 例，年龄 36～71 （平均60.5）岁. 伤后24 h 内取髂骨标本，能真实反映脊髓损伤前骨代谢状态，设为对照组B； 选择此实验组患者伤后1，6，12 mo 不同时期取髂骨标本，设为实验组A，其 中男19 例，为实验A1 组，女 11 例为实验A2 组，本组均为脊髓损伤引起截瘫， 其中颈椎截瘫16 例，胸椎损伤14 例. 伤后6～12 mo，有17 例截瘫未恢复， 13 例有不同程度恢复. 根据术前检查血清钙、磷，影像学资料和骨密度测定， 确诊损伤当时有骨质疏松者9 例，为实验A3 组；无骨质疏松者21 例，为实验 A4 组. 1.2 方法 1.2.1 标本的采集与制备采用自制微创活检器于髂前上棘后方2～2.5 cm 处获取2 cm 长的髂骨组织，生理盐水反复冲洗后，立即置入Millonigs 中固定 24 h，流水冲洗过夜，乙醇逐级脱水，二甲苯透明，甲基丙烯酸甲酯包埋，包 埋块经修整后用Leica 硬组织切片机制备5 μ m 厚的不脱钙切片，置于已上胶 的载玻片上，48℃烘箱中过夜，置入37℃乙二醇乙醚乙酸酯中50 min，乙醇逐 级水化，甲苯氨蓝染色10 min，枸橼酸缓冲液（pH=3.7）冲洗2 次，正丁醇脱 水，甲苯透明，中性树脂封片. 1.2.2 骨组织形态计量学观察与分析每一标本取2 张切片置于计算机图像 分析系统下进行观察与分析. 在放大率为4 倍的Olympus BH 2 型显微镜下， 以相同的间隔移动切片，所有的显微视野均经数码照相机（科达DCS420 型）输 入自动图像处理系统，以Freepius 软件获取和存储图像，以Freemax3.0 进行 图像分析. 每一图像中均划定兴趣区（Region of interest， ROI），ROI 中 应除外有明显骨组织碎裂的区域，所有测量均在ROI 中进行，测定以下参数用 于骨组织形态计量学分析. ROI 面积：实际上为ROI 内骨小梁和髓腔面积之和. Tb.Ar：为ROI 内所有的骨小梁面积之和. 皮质骨宽度（Ct.WI）：沿皮质骨的 内侧和外侧缘分别以Trace 命令描记，然后以Thick 命令得出内外缘间的平均 距离，即为皮质骨宽度. 总骨小梁表面长度（Tb.Pm）：为该视野中所有的骨小 梁边缘的长度之和. 结点数（T b.n）：结点为3 条