免疫学第三章 抗体.ppt

第三章 抗体（ANTIBODY） 第一节 免疫球蛋白的结构与类别 一、抗体的基本结构 1、抗体是免疫球蛋白 抗血清：抗原免疫后的动物血清中含有大量能与相应抗原结合的抗体分子，称抗血清。 血清蛋白成分：电泳分离后有四条带，从正极到负极依次为白蛋白、α、β、γ球蛋白。 试验证实：抗血清中的γ球蛋白组分明显高于正常血清，用抗原吸附处理抗血清后γ球蛋白含量恢复与正常血清一样，从而证明了抗体活性存在于γ球蛋白组分内；其后，进一步证明有小部分抗体活性存在于β球蛋白内。 免疫球蛋白是多链糖蛋白，具有蛋白质的通性，对物理及化学因素敏感，不耐热，在 60-70 ℃ 时即被破坏，能被多种蛋白水解酶裂解破坏，可在乙醇、三氯醋酸或中性盐类中沉淀。因此，通常用 50％ 饱和硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中提取抗体。 世界卫生组织（1968年）及国际免疫学会（1972年） 免疫球蛋白（immunoglobulin，Ig）: 具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。 抗体（antibody，Ab）： 是由浆细胞合成并分泌的一类能与相应抗原特异性结合的含有糖基的球蛋白。抗体分布于体液（血液、淋巴液、组织液及粘膜的外分泌液）中，主要存在于血清内。 免疫球蛋白的存在形式： 免疫球蛋白除分布于体液中之外，还可存在于B细胞膜上。 膜型（membrane immunoglobulin, mIg） --- B细胞膜上的抗原受体； 分泌型(secreted immunoglobulin, sIg) ---分泌进入体液, 介导体液免疫应答。 2、免疫球蛋白的基本结构 2.1 四链基本结构单位 由二硫键相连的四条对称的多肽链构成的单体。形成一“Y”字形结构。 木瓜蛋白酶（papain）酶解片段： 1959 年 Porter，兔 IgG 分子，三个片段即 2 个相同的 Fab 段和 1 个 Fc 段。 Fab 片段（fragment antigen-binding，Fab）：即抗原结合片段。 Fc 片段（fragment crystallizable，Fc）：在低温或低离子强度下可形成结晶，故称为可结晶片段。 Fab 片段： 每一个含有一条完整的 L 链和 H 链近 N 端侧的 1／2 。 Fc 片段： 含有两条 H 链羧基端（C 端）的一半。 Fab 片段： 每个 Fab 段结合抗原是单价的，即只能结合一个抗原决定簇。因此不能连结成较大的抗原抗体复合物，不出现凝集或沉淀现象。 Fc 片段： 包含 CH2 和 CH3 两个功能区，它无抗体活性。Ig 在异种间免疫所具有的抗原性主要存在于 Fc 片段，同时 Fc 段还具有活化补体、亲细胞、通过胎盘和介导与细菌蛋白结合等生物学活性。 胃蛋白酶酶解片段 1960年 Nisonoff 等 兔 IgG 分子，两个片段： 大片段为 1 个 Fab 双体，以 F（ab’）2 表示。 小片段 Fc 可被胃蛋白酶继续水解为小分子多肽，以 Fc‘表示。 胃蛋白酶的水解片段 F（ab’）2 片段：结合抗原为双价，可结合两个抗原决定簇，其结合抗原的亲合力要大于单价的 Fab，与抗原结合后可出现凝集或沉淀现象。 Fc’ 片段：不再具有任何生物学活性。 Fc 片段的生物学活性 l、与免疫球蛋白选择性通过胎盘有关 如人 IgG 通过胎盘进入胎儿体内与 Fc 片段有关; Brambell 已证实，胎盘母体一侧的滋养层细胞能摄取各类血浆蛋白，但其吞饮泡内只有 IgG 的 Fc 受体而无其它种类 Ig 的受体。与受体结合的 IgG 可得以避免被酶分解，进而通过细胞的外排作用，分泌到胎盘的胎儿一侧，进入胎儿循环。 补体可与抗原抗体复合物结合，其结合位点就位于抗体分子Fc片段的CH2上。 3、决定免疫球蛋白的亲细胞性 一些免疫细胞如巨噬细胞、淋巴细胞、嗜碱性粒细胞、肥大细胞等表面都具有免疫球蛋白的 Fc 片段的受体，因此，免疫球蛋白可通过其 Fc 片段与这些细胞表面的 Fc 受体结合。 Ig 与这些细胞 Fc 受体的结合部位因其种类不同而有差异，IgG 与巨噬细胞、NK细胞、B细胞 Fc 受体的结合部位是CH3，而 IgE 与嗜碱性粒细胞和肥大细胞 Fc 受体结合的部位是CH4。 4、与免疫球蛋白通过粘膜进入外分泌液有关 5、Fc 片段是决定各类免疫球蛋白抗原特异性的部位。 因无法从血清中获得大量均一的 Ig 用于 H 链和 L 链的 AA 顺序分析，所以 H 链和 L 链的细微结构长期以来并不十分清楚。 目前，主要借助于对本周氏蛋白（Bence-Jones p