dauricine daurisoline及pamd对大鼠肝脏药物代谢酶cyp 3a的影响word格式论文.docxVIP

全文主要缩略词1’-OHMDZ1-hydroxymidazolam1’-羟基咪达唑仑BSAbovine serum albumin牛血清白蛋白CYP3Acytochrome P4503A细胞色素 P4503ACYP450cytochrome P450细胞色素 P450DauDauricine蝙蝠葛碱DDIDrug-Drug interaction药物间相互作用DEXDexamethasone地塞米松DMSODimethyl Sulfoxide二甲基亚砜DSDaurisoline蝙蝠葛苏林碱ECLEnhanced ChemiluminescenceHigh-performance liquid chromato-增强化学发光HPLC-UVgraphy with ultraviolet absorbance detection高效液相色谱-紫外检测法LLOQLower limit of quantification最低定量限MDZMidazolam咪达唑仑Reduced Form of Nicotinamide-AdenineNADPHPAMDDinucleotide Phosphate Phenolic alkaloids from Menispermum daurieum还原型辅酶 II蝙蝠葛酚性碱PBShosphate buffer saline磷酸盐缓冲液RSDRelative standard deviatio相对标准偏差 十二烷基硫酸钠聚丙SDSSodium Dodecyl Sulfate Polyacrylamide烯酰胺Gel Electropheresis凝胶电泳TEMEDTetramethylethylenediamine四甲基乙二胺Dauricine, Daurisoline 及 PAMD 对大鼠肝脏药物代谢酶 CYP 3A 的影响 华中科技大学同济医学院药理系 硕士学位申请人：温馨指导老师：陈汇 教 授摘要 目的：探讨蝙蝠葛碱（Dauricine，Dau）、蝙蝠葛苏林碱（Daurisoline，DS）以及 蝙蝠葛酚性碱（PAMD）对大鼠肝微粒体细胞色素 P450 3A 酶的影响。 方法：SD雄性大鼠分为6组（每组6只），分别以Dau（150mg/kg/d）、DS（75mg/kg/d）、 PAMD低剂量（25mg/kg/d）和PAMD高剂量（50mg/kg/d）ig 给药，空白对照组 给予5% CMC-Na (10mL/kg/d)，连续6d；阳性对照组用地塞米松 (DEX 75 mg/kg/d) ip 给药，连续4d。各组大鼠均于末次给药24h后处死，钙沉淀法制备大鼠肝微粒 体，选取咪达唑仑(MDZ)作为“探针药物”，采用HPLC-UV技术，通过测定其主 要代谢产物1’-羟基咪达唑仑（1’-OHMDZ）来评价CYP 3A活性。采用蛋白免疫 印迹法检测大鼠肝脏CYP3A酶在蛋白水平上的相对表达量。 结果 ： 咪 达 唑 仑 探 针 法 测 定 酶 活 性 的 结 果 显 示 , 与空白对照组相比， Dau（150mg/kg/d）、DS（75mg/kg/d）、PAMD低剂量（25mg/kg/d）和PAMD高剂量（50mg/kg/d）ig 给药连续6d，使大鼠肝脏CYP3A酶活性均显著增加，其诱导倍 数分别是1.48倍、1.69倍、1.29倍和1.71倍（P0.01），且PAMD随剂量增加诱导 作用有增加趋势；Western Blotting结果显示，Dau、DS、PAMD低剂量和高剂量 组CYP 3A的蛋白表达量均明显增高，增高倍数分别为对照组的1.48倍 (P 0.05)、 1.63倍 (P 0.01)、1.33倍 (P 0.05)和2.16倍 (P 0.01)，且PAMD随剂量增加其蛋白表达增加。结论： Dau、DS和PAMD可提高大鼠肝脏CYP3A的酶活性，并可通过转录后水 平调控诱导大鼠肝脏CYP3A的活性，表明Dau、DS和PAMD对大鼠肝微粒体细胞 色素P450 3A均有一定程度的诱导作用，提示该类药物与其他药物合用可能具有潜在的药物间相互作用，有待进一步研究和探索。关键词：蝙蝠葛碱；蝙蝠葛苏林碱；蝙蝠葛酚性碱；细胞色素 P4503AEffects of Dauricine, Daurisoline and PAMD on Hepatic Drug Metabolizing Enzyme CYP 3A in RatsDepartment of Pharmacology, Tongji Medical College ofHuazhong University of Science and Technology Master candidate: Wen Xin Supervisor: Profe