HPLC法测定苦甘颗粒中盐酸麻黄碱含量.docVIP

HPLC法测定苦甘颗粒中盐酸麻黄碱含量 　　【摘要】目的:建立高效液相色谱法测定苦甘颗粒中盐酸麻黄碱的含量。方法:用C??18?柱(Hypersil ODS柱,4.6mm×250mm,5μm)。流动相为:乙腈-0.1%磷酸溶液(5∶95)为流动相;流速1.0mL?min??-1?;检测波长210nm。结果:盐酸麻黄碱进样量为0.03～0.32μg范围内呈良好的线性关系(r=0.9990),平均回收率为99.8%,RSD为2.8%。结论:该法准确、可靠、重复性好,为苦甘颗粒的质量控制提供了依据。? 　　【关键词】苦甘颗粒;盐酸麻黄碱;高效液相色谱法? 　　doi:10.3969/j.issn.1006-1959.2010.09.396文章编号:1006-1959(2010)-09-2622-02 　　 　　苦甘颗粒系由麻黄、黄芩、苦杏仁、黄芩、甘草等组成的中药制剂,具有疏风清热、宣肺化痰、止咳平喘等功效。此产品收载于卫生部药品标准中药成方制剂第10册,原质量标准只有两个简单的理化鉴别,无法进行有效的质量监控,为了更好地控制该药品质量,研究将对该制剂中的主药麻黄作为含量测定对象,根据文献??[1-2]?现采用高效液相色谱法对该药中盐酸麻黄碱进行含量测定。? 　　1.仪器与试药? 　　1.1仪器:美国高效液相色谱仪(Waters510泵,Waters484紫外检测器,WatersU6k-037378进样阀,Echrom98色谱数据处理工作站一大连依利特科学仪器有限公司。? 　　1.2试药:盐酸麻黄碱对照品(中国药品生物制品检定所,批号:171241-200803),供含量测定用;乙腈为色谱纯、磷酸为分析纯;水为重蒸馏水;苦甘颗粒样品由河北恒祥药业提供,规格4g/袋;其余试剂均为分析纯。? 　　2.方法和结果? 　　2.1色谱条件:色谱柱:HypersilODSC??18?柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-0.1%磷酸溶液(5∶95);检测波长:210nm;柱温:室温;流速1.0mL/min??-1?,进样量10μL。在此条件下,盐酸麻黄碱保留时间约为20min,理论板数按橙皮苷计算不低于2000。? 　　2.2溶液制备:? 　　2.2.1对照品溶液:精密称取盐酸麻黄碱对照品适量,加甲醇制成每1mL含8μg的溶液,摇匀,作为对照品溶液。吸取10μL检测。? 　　2.2.2供试品溶液:取装量差异项下本品适量,研细,取细粉约4g,精密称定,加0.1mol/L的盐酸溶液约20mL,超声(150w,40kHz)30min,取出,放冷,用氨试液调pH值至12-13,用乙醚提取3次,每次20mL,合并乙醚液,加1%盐酸甲醇溶液2mL,摇匀,挥干,残渣加甲醇,使溶解并转移至10mL量瓶中,加甲醇稀释至???度,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品溶液。吸取10μL测定,各个组分分离良好。? 　　2.2.3阴性对照品溶液:精密称取阴性对照品约4g,同上法制成盐酸麻黄碱阴性对照溶液,精密量取10μL,注入液相色谱仪,(见图1-图3)。阴性对照液在盐酸麻黄碱峰位置无色谱峰,故定量不受其他色谱峰干扰。? 　　 　　图1盐酸麻黄碱对照品图谱? 　　 　　图2苦甘颗粒中不含盐酸麻黄碱的阴性图谱?? 　　? 　　? 　　图3苦甘颗粒图谱? 　　2.3标准曲线的制备:精密称取盐酸麻黄碱对照品,加甲醇制成浓度依次为:0.003、0.006、0.008、0.016、0.032mg/mL的溶液,各精密吸取10μl,依次进样,记录色谱图,以进样量(μg)对峰面积进行线性回归,得回归方程Y=13302X+12197,r=0.9990。盐酸麻黄碱在进样量0.03～0.32μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。? 　　2.4方法重复性:同一批样品,精密称取5份,按2.2.2的方法依法操作,结果RSD(%)=1.86%(n=5),符合规定。2.5精密度试验:精密吸取上述对照品溶液,重复进样5次,测定峰面积分别为676039、682592、690081、685424和659125,RSD为1.54%(n=5)。? 　　2.6稳定性试验:取苦甘颗粒(批号080612),按2.2.2项下方法制备供试液,按2.1色谱条件分析于0、1、2、4和6h,分别精密吸取供试液10μL进样。测定峰面积依次为421266、425080、426012、426986和427507,RSD为0.58%。表明样品在6h内稳定。? 　　2.7加样回收率试验:称取已知盐酸麻黄碱含量的本品,研细,取细粉适量(约为含量测定的1/2量)精密称定,共6份,分别置于锥形瓶中,精密加入一定量的盐酸麻黄碱对照品溶液(16μg/mL),按照含量测定供试品处理方法制备