阿托伐他汀与阿司匹林联用对家兔血小板聚集作用影响.docVIP

阿托伐他汀与阿司匹林联用对家兔血小板聚集作用影响 　　摘 要：目的：研究阿托伐他汀（atorvastatin，ATV）与阿司匹林（aspirin，ASA）联用对花生四烯酸（arachidonic acid，AA）和二磷酸腺苷（adenosine diphosphate，ADP）诱导的家兔血小板聚集作用的影响。方法：运用比浊法原理，经TYXN-96型多功能智能血液凝聚仪测定ATV与ASA单用及联用对家兔血小板聚集作用的影响。结果：ATV与ASA均能抑制AA和ADP诱导的离体和在体家兔血小板的聚集，且ATV和ASA联合应用抑制作用更强。结论：ATV和ASA联用可增强对AA和ADP诱导的家兔血小板聚集的抑制作用，提示临床联用这些药物治疗血栓等栓塞性疾病或使用其复方制剂可能具有更好的效果。 　　关键词：阿托伐他汀；阿司匹林；家兔；血小板聚集 　　中图分类号：R965.2文献标识码：A文章编号：1673-2197（2008）09-0035-03 　　 　　目前，血脂紊乱、血粘度增高和血栓形成引起的心脑血管阻塞性疾病的发病率越来越高，研究有效调血脂和降低血粘度、抑制血小板聚集的药物非常重要。阿托伐他汀(atorvastatin，ATV)是目前全球销量最大的调血脂药物，据报道，其不仅具有调血脂作用，还可降低血小板聚集因子CD62p、CD63和血小板A颗粒膜蛋白水平，提示可能具有抗血小板聚集作用。阿司匹林(乙酰水杨酸，ASA)是用于临床达100余年经久不衰的解热镇痛、抗炎、抗风湿、抑制血小板聚集的非甾体抗炎类药物，也是目前全球使用最多的抗血小板聚集药［1］。大量研究表明，ASA具有减少心血管事件（急性心肌梗死、猝死，需紧急行冠脉内介入治疗）的发生率［2］。因其与ATV的作用机制不同，可能具有协同抗血小板聚集作用。但至目前未见ASA与ATV联用以抗血小板聚集的研究报道。本篇拟就此作初步探讨，为临床用药或研制新的复方制剂提供依据。 　　 　　1 材料 　　 　　1.1 供试动物 　　健康家兔，雌雄兼用，体重2~3kg，由广东医学院实验动物中心提供(合格证号：粤实动证字第2007082号)。 　　1.2 药品及试剂 　　阿司匹林，由德国Bayer Health Care AG生产，批号：BTA5B35/2。阿托伐他汀钙，由辉瑞公司生产，批号二磷酸腺苷(adenosine diphosphate，ADP)系瑞士进口分装，批号：11008A-08。花生四烯酸(arachidonic acid，AA)为Sigma公司产品，批号：066K1218，现配现用。 　　1.3 主要仪器 　　TYXN-96型多功能智能血液凝聚仪，由上海通用机电技术研究所生产。80-2型电动离心机，由金坛市新航玻璃仪器厂生产。AY120型分析天秤，由日本SHIMADZU 公司生产。 　　 　　2 方法 　　 　　2.1 血小板血浆制备 　　离体试验用自动采血针自清醒家兔耳缘静脉取血，在体试验用自动采血针在3.5%戊巴比妥钠腹腔麻醉下通过心脏穿刺取血，取血后直接注入到含有3.28%的枸橼酸钠（血液量与枸橼酸钠体积比为9∶1）的试管中，在20~25℃条件下以500r?min?-1的速转离心5min，即得上层富血小板血浆（platelet rich plasma，PRP），余下的血浆再以3000r?min?-1的转速离心10min，得上清液即为贫血小板血浆（platelet poor plasma，PPP）［3］。 　　2.2 血小板聚集抑制率的计算 　　血小板聚集抑制率按下式计算：IR=（CGR－TGR）/CGR×100%； 　　IR：聚集抑制率(%)；CGR：对照管聚集百分率(%)；TGR：试验管聚集百分率(%)。 　　2.3 药物试验 　　取体重2～3kg的正常家兔，雌雄兼用，在体和离体试验均随机均分为生理盐水（NS）组、ATV组、ASA组及ATV+ASA组，每组8只。 　　2.3.1 离体试验 　　分别取生理盐水(NS)、ATV(60μg?mL?-1)、ASA(800μg?mL?-1)及ATV与ASA的混合物(含ATV 30μg?mL?-1、ASA 400μg?mL?-1)各20μL，加入180μL PRP中置于37℃孵育4min。由PPP调零后，用微量进样器在不同比色杯中分别加入AA和ADP诱导剂11μL(AA的最终浓度为0.35mmol?L?-1，ADP最终浓度为2μmol?L?-1)，按比浊法用TYXN-96型多功能智能血液凝聚仪测定离体家兔用药前后血小板5min内聚集率，同时计算药物对血小板聚集的抑制率。 　　2.3.2 在体试验 　　取上述家兔，分别用生理盐水(2mL?kg?-1)、ATV(2