博尔纳病病毒感染对新生大鼠海马中神经系统相关micrornas的影响-effects of borna disease virus infection on microrna s related to nervous system in hippocampus of neonatal rats.docxVIP

英汉缩略语名词对照英文缩略语英文全称中文全称BDVBorna disease virus博尔纳病病毒LTPLong Term Potentiation长程增强效应bpbase pair碱基对IFNinterferon干扰素SNPsingle nucleotide polymorphisms单核苷酸多态性RISCRNA-induced silencing complexRNA 诱导的基因沉默复合物PBSphosphate buffer saline磷酸缓冲盐溶液RT-qPCRreverse transcriotion quantificational real-time polymerasechain reaction逆转录 - 实时荧光定 量聚合酶链反应dd H2ODouble distilled H2O双蒸水cDNAComplementary deoxynucleic acid互补脱氧核糖核酸 DEPCDiethyl pyrocarbonate二乙基焦磷酸胺 dNTPDeoxyribonucleoside triphosphate脱氧核糖核苷三磷酸RNaseRibonuclease核糖核酸酶NBDNeonatal Borna Disease新生博尔纳病 PBMCsPeripheral Blood Mononuclear Cells外周血单个核细胞 CSFCerebrospinal Fluid脑脊髓液TLRtoll-like receptortoll 样受体hnRNPheterogeneousnuclear ribonucleoprotein核不均一核糖核蛋白GWASGenome Wide Association Study全基因组关联分析1博尔纳病病毒感染对新生大鼠海马中神经系统相关MicroRNAs的影响 摘要背景及目的博尔纳病病毒（Borna Disease Virus，BDV）是一种非分节段单股 负链 RNA 病毒，具有高度嗜神经性,不仅可能使神经系统来源细胞株形 成持续性的非细胞溶解性感染，而且可以使人类感染暴发流行脑炎， 也很容易使动物的中枢神经系统尤其是边缘系统(如海马)受到感染，产 生如焦虑、过度兴奋、攻击、异常游戏行为及认知缺陷等类似于人类 精神分裂症、孤独症等情感障碍疾病的宿主行为障碍。微小RNA (MicroRNAs, miRNAs)是一类新发现的非编码小RNA分 子，它们能够通过与靶基因mRNA上的特定序列结合抑制靶基因的翻 译或剪切，进而参与到各种生物学过程, 包括发育、细胞分化、肿瘤生 长等。许多miRNA与病毒复制、增殖以及细胞的应答等有关。miRNA 芯片技术通过对 miRNA 表达谱进行高通量的全面分析，1本研究受国家重大科学研究计划(973 计划；2009CB918300)资助2提供一系列数据信息，有助于从中提炼出新的假说，揭示疾病的分子机制。研究 miRNA 在宿主抗病毒感染过程中所起的作用，可能会为 miRNA 与病毒感染的研究提供新的途径。本课题旨在研究 BDV 病毒 对新生 SD 大鼠海马中 miRNA 表达及生物学功能的影响。方法1、选用出生后 24 h 内的新生 SD 大鼠，颅内接种病毒滴度为 2×105 FFU/ml 的 BDV Hu-H1 病毒液，构建神经发育障碍模型（BDV 组或 CON 组），并用等量 PBS 液接种作为正常对照组（CON 组）。2、感染 56 d 后，分离出 20 只（10 只/组）大鼠的海马。3、8 只（4 只/组）海马用 Trizol 法提取出 miRNA 后，进行芯片 检测和生物信息学分析，初步筛选出显著性异常表达的 miRNA。4、6 只（3 只/组）海马用 Qiagen 试剂盒提取出 miRNA 后，进行RT-qPCR 检测，进一步验证初步筛选出的 miRNA。结果1、miRNA 芯片检测初步筛选出 9 个显著性异常表达的 miRNA。 与 CON 组相比，BDV 组 7 个 miRNA (miR-145*, miR-146a*, miR-192*, miR-200b, miR-223*, miR-449a 和 miR-505)显著性上调，2 个 miRNA (miR-126 和 miR-374)显著性下调。2、RT-qPCR 进一步验证后，5 个(miR-126, miR-200b, miR-374, miR-449a 和 miR-505) 显 著 性 下 调 (P0.05) ， 其余 4 个 (miR-145*,3miR-146a*, miR-192*, miR-223*) 没有显著性变化。结论1、本研究首次报道了 BDV 病毒对新生 SD 大鼠海马中 miRNA 表 达及生物学功能的影响。2、本研究推测出 miR-126，miR-2