实验性近视眼细胞凋亡及相关凋亡基因bcl-2和细胞因子bfgf的研究-study on apoptosis and related apoptosis genes bcl - 2 and cytokine bfgf in experimental myopia.docxVIP

山东大学博士学位论文。，胞中表达的阳性率选健康周龄豚鼠只用组织块培养法培养后极部巩膜细，。，，胞用免疫荧光法对培养的细胞进行鉴定取第代巩膜细胞用于药物作用实验，、分为组其中组为正常对照组即巩膜细胞加入自制培养基未被照射，组组为单纯劝、组即体外培养的正常巩膜细胞被紫外光照射组组，，。组和组分别为预处理组组为在照射前加入酬，组为在照射前加入组为在照射前加入。，，观察对豚鼠巩膜成纤维细胞凋亡的影响在对豚鼠巩膜细胞进行培养过程，一中加入不同浓度的利用紫外线诱导细胞凋亡模型应用流式细胞仪和，对凋亡的细胞数量进行检测利用高清晰度彩色病理分析，，，系统用彩色分割方式测定每个视野中的染色阳性细胞的面积计算阳。一，性细胞面积占每个视野组织面积的百分比同时应用逆转录聚合酶链式反应飞法和蛋白印迹技术从及蛋白水平测定一。对表达的影响，，一结果第一部分本研究中豚鼠配戴两种不同度数的凹透镜实验后诱导眼。一一。的屈光状态发生了明显变化配戴和的凹透镜周后分别诱导出一，，，士和士的近视与对照眼比较有显著统计学差异且伴有眼轴，，的代偿性生长眼轴分别延长了士和士与对照组比较。差异具有统计学意义用检测对照组无凋亡细胞而诱导眼后极部巩膜、。细胞中凋亡细胞指数分别为士一组士一组，显著高于对照组差异有统计学意义而免疫组织化学法检测近视眼模型和对照、，，组巩膜细胞中细胞增生指数分别为士一组士、，一组，对照组为士明显高于实验眼的值差异具有统计。，，，学意义透射电镜检测到组的巩膜成纤维细胞凋亡数量增多主要表现，，，，为细胞分布不均匀部分细胞脱失细胞形态不一细胞间隙增大失去紧密，，。。连接细胞内空泡形成线粒体肿胀部分细胞皱缩几乎脱离基底膜细胞核，，固缩染色质边聚并可见典型凋亡小体组未见典型凋亡细胞，，一第二部分通过对豚鼠近视眼后极部巩膜组织免疫组化染色切片的观察，。，，组一透镜只中有例表达呈阳性阳性率为只表，达呈阳性阳性率为组一透镜例表达呈阳性阳性山东大学博士学位抢文，，一，。率为例表达呈阳性阳性率为对照组巧只眼中只出一，。，，一现阳性阳性率达例出现阳性阳性率为实验组与对照组比较的变化有统计学意义在三组间的变化也有统。一，一，计学意义，豚鼠巩膜组织培养后周开始有细胞长出周融合免疫荧光鉴定细。，胞为成纤维细胞在对细胞凋亡影响的实验中组正常对照组，，染色为阴性基本无绿色强荧光染色的凋亡细胞组单纯组凋亡细胞阳性率为士组在照射前加入为，，。士组在私照射前加入为士组在，照射前加入岁为士与正常对照组无光照组比较，、、、组凋亡率的差异均有显著性意义说明细。胞凋亡模型能够成功地诱导出细胞凋亡组岁及组，。留细胞凋亡率与与单纯照射组比较差异具有显著性。，意义而组议与其比较差异无统计学意义。说明以上对细胞凋亡的抑制作用有显著作用应用流式细胞仪检测组细胞的凋亡率分别是，，，，，与。法的检测结果基本一致一，。凝胶图像分析软件分析’结果显示组正常对照组含量为士组单纯组为士与组比组在照射前加入幼为士组组在在照射前加入照射前加入为为士士，。与组比较，。与组比，。与组比、。，组组及组，与单纯照射组比较差异均具有显著性意义与正常对照组相比，组和组有显著性差异。一一说明以上对引起一升高有显著作用，、、对豚鼠巩膜细胞中蛋白表达的影响是应用法，、、进行检测经系统分析正常对照组单纯组在照射前加入在照射前加入组山东大学博士学位论文一一。蛋白含量与蛋白产物比值的平均值分别为士，，，，，士士士士组巩膜成纤维细胞的一有，，一定表达组经照射后一蛋白表达很低而经处理后的巩膜细胞、、。，，三组的一蛋白含量增强组与组比较差异具有统计学意义。，。，。组与组比较差异具有统计学意义组与组比较。差异具有统计学意义组与组比较差异具有统计学意义，一表明随着浓度的增高蛋白表达的增加的差异具有统计学意义。。，结论豚鼠配戴凹透镜周后形成近视在透镜诱导豚鼠实验性近视眼后极，一部巩膜组织中不仅有细胞增殖的降低而且还存在细胞凋亡的表达增多同时透镜诱导的豚鼠近视眼后极部巩膜细胞中凋亡抑制基因和碱性成纤维细，胞生长因子的含量都随着近视屈光度的增加而降低说明二者不仅在，豚鼠后极部巩膜组织中有表达而且还与实验性近视眼巩膜组织病理性改变密切，。。相关并参与了实验性近视眼的发病机制，体外培养的豚鼠巩膜细胞在紫外线的照射下能够诱导出巩膜细胞的凋亡一定浓度的外源性的碱性成纤维细胞生长因子能够通过上调凋亡抑制一。基因而抑制凋亡的发生，透镜诱导豚鼠实验性近视眼后极部巩膜中细胞凋亡率的增加与后极部巩膜一中碱性成纤维细胞生长因子的含量下降而导致凋亡抑制基因的。下调有关，一，关键词近视细胞凋亡碱性成纤维细胞生长因子细胞淋巴瘤，，一白血病基因巩膜成纤维细胞山东大学博士学位论文一，从即一叭一初，一，一一一，，一，，一，、山东大学博士学位论文们以一一，七，，，，，一，加，一一一士一士，士们们以