蚀木链霉菌耐热内切纤维素酶基因克隆及其在大肠杆菌中表达-cloning and expression of thermostable endocellulase gene from streptomyces saprophyticus in e.coli..docxVIP

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  • 2018-08-01 发布于上海
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蚀木链霉菌耐热内切纤维素酶基因克隆及其在大肠杆菌中表达-cloning and expression of thermostable endocellulase gene from streptomyces saprophyticus in e.coli..docx

蚀木链霉菌耐热内切纤维素酶基因克隆及其在大肠杆菌中表达-cloning and expression of thermostable endocellulase gene from streptomyces saprophyticus in e.coli.

独创性声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研 究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人 已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得 河北农业大学 或其他教育机构 的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者签名: 签字日期: 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解 河北农业大学 有关保留、使用学位论文的规定, 有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借 阅。本人授权河 北农业大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进 行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。 (保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名: 导师签名: 签字日期: 年 月 日 签字日期: 年 月 日 学位论文作者毕业后去向: 工作单位: 电话: 通讯地址: 邮编: 蚀木链霉菌耐热内切纤维素酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 蚀木链霉菌耐热内切纤维素酶基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 河北农业大学硕士学位(毕业)论文 河北农业大学硕士学位(毕业)论文 PAGE PAGE 13 PAGE PAGE 10 1 引 言 1.1 纤维素概述 1.1.1 纤维素的结构及构成 纤维素是地球上最丰富的可再生性资源,地球上每年大约产生这类有机物2000 亿吨[1],但同时又是数量最大的一类环境污染物,如果充分利用和降解纤维素,对于 解决影响可持续发展的粮食生产,环境污染,能源危机等几个方面的问题,起着重要 的作用[2]。 纤维素是一种无水葡萄糖的线性多聚体分子,其重复单位称纤维二糖,是植物 细胞壁的主要组分之一,它的主要功能是增强细胞壁的机械支撑强度、维持不透水性 能及抗逆性[3]。一般情况下,天然纤维素和其他结构多聚物基质共同构成植物的结构 主体(植物干重的35%-50%是纤维素,20-35%为半纤维素,还有5-30%的木质素,少 数组织还几乎由纯纤维素构成。除了植物外,纤维素还存在于被囊类动物(tunicates) 和少数细菌中[4]。 从目前的认识来看,天然合成的纤维素是由葡萄糖糖基长链构成的独立的分子, 这些分子在生物合成部位发生自组装。大约30个独立的纤维素分子组装成大的结构单 位——初级纤维(或原纤维),在此基础上包装成更大的结构单位——微纤维,最后由 微纤维组装成我们熟知的纤维素纤维。在此基础上组装成诸如细胞壁、纤维质、表皮 等超结构。 纤维素各个分子包装得非常紧密,酶等大分子不能渗透,水等小分子也不能渗 透。纤维素有另一个重要特点是结构晶体化,晶体化结构的分布是离散的,距离不等。 统计学上,纤维素的结构是连续的,从完全晶体状态到完全无定形状态,中间存在各 种中间层次的结构。除了上面的两种结构之外,纤维素纤维还有多样的不规则性,像 微纤维存在扭曲和打结等。各种用于研究纤维素水解和微生物利用的纤维素材料在精 细结构上相当不同,经去除木质素而制造的综合纤维素含有丰富的半纤维素;微晶纤 维素(Avicel)在制造过程中去掉了半纤维素和纤维素的无定形结构,几乎是纯品纤维 素晶体;细菌纤维素跟植物纤维素一样高度晶体化,但是两者晶体中糖基的排列不同, 所以选择不同的底物会影响最后的结论。纤维素结构上的复杂性和不溶于水的性质所 带来的处理上的困难使得高水溶性的羧甲基纤维素(carboxymethylcellulose,CMC)成 为研究众多纤维素酶,尤其是内切葡聚糖酶的常用底物。不足之处是使用这种底物在 一定程度上削弱了纤维素酶“分解纤维素”意义,毕竟人们希望用纤维素酶来处理不 溶于水的天然纤维素。 1.1.2 纤维素的降解 纤维素的降解主要由酸水解、酶水解和微生物水解。酸和酶水解可用于生产糖浆 供食品工业作甜味剂,并通过发酵转变为醇、燃料和其它化学产品;微生物水解可用 于生产供动物作饲料的单细胞蛋白。 (l)纤维素的酸水解 纤维素大分子中的β-1,4-糖苷键是一种缩醛键,对酸特别 敏感,在适当的氢

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