Galectin3和Ecadherin蛋白在胃癌中表达及其意义.docVIP

Galectin3和Ecadherin蛋白在胃癌中表达及其意义 　　[摘要] 目的 探讨Galectin-3和E-cadherin蛋白在胃癌中的表达及其意义。 方法 选择60例胃癌组织标本，采用免疫组化方法检测胃癌组织中Galectin-3和E-cadherin蛋白的表达情况，同时选择60例正常胃黏膜检测Galectin-3和E-cadherin蛋白的表达情况作为对照。 结果 胃癌组织Galectin-3阳性表达率高于正常胃黏膜组织（P 0.01），E-cadherin蛋白阳性表达率低于正常胃黏膜组织（P 0.01）。分化程度越高、浸润程度越浅、淋巴结无转移的胃癌组织E-cadherin蛋白阳性率越高（P 0.01）。浸润程度越深、淋巴结有转移的胃癌组织Galectin-3的阳性表达率越高（P 0.01）。 结论 胃癌组织中E-cadherin阳性表达率低于正常胃黏膜组织、Galectin-3的阳性表达率高于正常胃黏膜组织。E-cadherin的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移有关，而Galectin-3表达率与肿瘤的浸润深度、淋巴结转移有关。 　　[关键词] 胃癌；Galectin-3；E-cadherin蛋白 　　[中图分类号] R735.2 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2013）24-0086-03 　　胃癌是临床常见的恶性肿瘤，近年来死于胃癌的患者呈逐年上升的趋势。癌症的发生与多种因素相关，而胃癌的侵袭以及转移是导致患者死亡的主要原因之一。Galectin-3是一种凝集素，参与多种生理以及病理过程，其在细胞生长、凋亡、粘附以及新生血管形成、肿瘤细胞转移和浸润中均发挥重要的作用。E-cadherin蛋白是一类介导细胞间同质粘附的钙依赖性跨膜糖蛋白，其表达与恶性肿瘤的分化程度、侵袭力、转移呈负相关，与预后呈正相关[1]。本研究探讨胃癌组织中Galectin-3及E-cadherin蛋白的表达，分析其在胃癌的发生、发展中的作用。 　　1资料与方法 　　1.1 一般资料 　　选择2010～2012年在我院手术治疗切除的胃癌组织标本60例，其中男28例，女32例，年龄31～66岁，平均（53.1±18.4）岁。肿瘤直径4 cm者25例，≥4 cm者35例。肿瘤浸润深度：黏膜及黏膜下层（T1+T2）者8例，肌层及浆膜层（T3+T4）者52例。淋巴结转移：有32例，无28例。分化程度：高分化及中分化29例，低分化31例。同时取手术切除组织正常切缘的正常胃黏膜组织作为对照组。 　　1.2检测方法 　　采用免疫组化法对胃癌黏膜组织以及正常胃黏膜组织中Galectin-3及E-cadherin蛋白表达进行检测。Galectin-3兔抗人单克隆抗体由上海研生生物技术科技有限公司提供，E-cadherin兔抗人单克隆抗体由上海研生生物技术科技有限公司提供。标本甲醛固定、石蜡包埋、连续4 μm切片。清洗玻片后烤干，浓硫酸中浸泡24 h，冲洗后烘干，多聚拉氨酸进行放脱片处理，烤干，备用。切片，梯度酒精脱水、水洗。3%的过氧化氢溶液室温下孵育15 min，以封闭内源性过氧化物酶的活性。水冲洗后，PBS缓冲液洗涤3次。将切片置于枸橼酸缓冲液中，微波炉内高火烘烤5 min，中高火烘烤8 min，冷却至室温。然后自来水冲洗，蒸馏水冲洗，PBS缓冲液洗涤3次。甩干，加入封闭血清，在37℃下孵育15 min。倒去血清，滴加一抗或者一抗的工作液，37℃，孵育2 h。PBS缓冲液洗涤3次。加二抗工作液，37℃，孵育20 min，PBS缓冲液洗涤3次。加DAB显色液，有表达后立即终止显色。 　　1.3 免疫组化结果判定 　　1.3.1 Galectin-3结果判定 位于上皮细胞的胞浆内，棕黄色颗粒。判断结果[2]：每张切片随机观察5个视野，统计阳性细胞数，取平均阳性率记分。0分：5%；1分：5%～24%；2分25%～49%；3分：50%～74%；4分：≥75%。染色强度：0分：无着色；1分：淡黄色；2分：黄色或者棕黄色；3分：褐色或者棕褐色。阳性细胞率得分+染色强的得分3～6分者为染色阳性。 　　1.3.2 E-cadherin蛋白结果判定 在正常组织内位于上皮细胞的细胞膜上，在癌组织中位于细胞浆和细胞膜中。染色呈一致的棕黄色颗粒。染色阳性判断标准与Galectin-3结果判定相同。 　　1.4 观察指标 　　比较胃癌组织与正常胃黏膜组织中Galectin-3及E-cadherin蛋白表达阳性率。统计患者的一般资料以及临床资料，分析不同临床病理参数与Galectin-3及E-cadherin蛋白表达阳性率的关系。 　　1.5 统计学分析 　　采用SPSS 12.0统计学软件对数据进行相关