MiR200对肾癌细胞增殖影响分析.docVIP

MiR200对肾癌细胞增殖影响分析 　　[摘要] 目的 研究MiR200对肾癌细胞增殖的影响。 方法 整群选取2013年1月―2015年1月于齐齐哈尔医学院第三附属医院就诊的51例肾癌患者病理细胞和正常癌旁组织细胞，以及构建裸鼠肾癌模型，测量MiR-200在不同细胞中的表达量和肿瘤增殖情况。 结果 MiR-200在裸鼠的SN12-PM6和人的786-o 、A498表达中均低于正常组织的表达（P0.05），在48 h后能够抑制肾癌细胞增殖（P0.05），48～72 h抑制情况最为显著（P0.05）。 结论 MiR-200在肿瘤细胞中呈低表达水平，能够抑制肾癌细胞增殖并能够抑制裸鼠肾癌细胞生长。 　　[关键词] MiR200；肾癌细胞；增殖 　　[中图分类号] R737.11 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2016）06（b）-0023-02 　　[Abstract] Objective MiR200 proliferation of kidney cancer. Methods Group selection from January 2013- January 2015， 51 patients in the Third Affiliated Hospital of Qiqihar Medical University with renal cell carcinoma pathological cells and adjacent normal tissue cells， renal cancer and build nude model， measuring MiR-200 in different cells and the expression of tumor proliferation. Results MiR-200 in nude mice SN12-PM6 and human 786-o， A498 expression were lower than normal tissue expression （P 0.05）， at 48h after kidney can inhibit cancer cell proliferation （P 0.05）， 48～72 h inhibition was most significant，（P 0.05）. Conclusion MiR-200 showed low levels of expression in tumor cells， can inhibit the proliferation of renal cell carcinoma and renal cancer cell growth in nude mice can be suppressed. 　　[Key words] MiR200；Renal cell carcinoma；proliferation 　　临床上发现肾癌的患病例数逐年增加，而通常肾癌晚期已经失去了最佳手术机会，放疗和化疗成为了治疗肾癌的主要手段[1]。研究发现[2-3]，MiRNAs在肿瘤发生过程中具有重要作用，可能会影响肿瘤细胞增殖，该研究以2013年1月―2015年1月于齐齐哈尔医学院第三附属医院就诊的51例肾癌患者和BALB/C裸鼠为研究对象，旨在研究MiR200对肿瘤细胞增殖的影响。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　该研究经院伦理委员会批准并取得患者知情同意。整群选取2013年1月―2015年1月该齐齐哈尔医学院第三附属医院肾癌住院患者51人病理资料，其中男28人，女23人，年龄43～78岁，平均（62.63±4.89）岁。所有患者均经病理学检查确诊为肾癌[4]，未合并糖尿病等其他脏器功能障碍。实验用20只BALB/C裸鼠购自北京市疾病预防控制中心，4～5周，16～18 g，随机分为两组，每组各10只，分别为MiR-Ctr组和MiR-200组，均按照SOF级环境饲养并按照动物建模手术操作原则进行操作。鼠源肾癌细胞株SN12-PM6，人源肾癌细胞株A498和786-o购自北京协和医学院基础医学院细胞中心。用MTT法检测MiR-200对肾癌细胞的增殖抑制率。 　　1.2 裸鼠建模及肾癌肿瘤细胞生长检测 　　裸鼠肾SN12-PM6细胞，培养至对数生长期，消化离心PBS重悬，冰上保存。裸鼠腹腔注射1%水合氯醛溶液麻醉，将已备好的细胞悬液20 μL植于鼠左侧肾脏实质内，缝合皮肤，置于SPF下饲养。隔日观察裸鼠体重，第5周时用影像学方法检测肿瘤细胞生长情况。第6周末处死裸鼠，解剖取其双肾，称量双肾后用4%多聚甲醛溶液固定，制作石蜡、切片并进行HE染色及免疫组化反应