三七达玛烷型皂苷分离纯化方法研究进展.docVIP

三七达玛烷型皂苷的分离、纯化方法研究进展 　　【摘要】目的：总结三七达玛烷型皂苷分离、纯化方法的研究概况。方法：通过CNKI搜集相关论文和论著进行分析、总结。结果：三七达玛烷型皂苷的分离、纯化方法多样化。结论：对三七达玛烷型皂苷的分离、纯化方法研究可为今后三七达玛烷型皂苷的进一步研究提供理论依据。 　　【关键词】三七；达玛烷型皂苷；分离、纯化方法 　　三七（Panax notoginseng（Burk. ）F.H. Chen），又名田七、山漆等为五加科（Araliaceae）人参属植物，其性温、味甘、微苦、归肝、肾、胃经，具有止血化淤、消肿定痛之功，被誉为血症良药、伤科要药[1]。三七是我国特有的名贵中药材，也是我国最早的药食同源植物之一， 具有“金不换”、“南国神草” 之美誉。由于对环境要求的特殊性，三七主要集中分布于云南和广西。其主要活性成分为达玛烷型四环三萜皂苷，随着人们对三七研究的深入，对三七有效成分的分离、纯化方法的研究也不断深入，以下我们就三七分离、纯化方法做一总结。 　　1.分离及纯化 　　三七中有效成分常用的分离及纯化方法有溶剂法、沉淀法、泡沫分离法、柱层析法、结晶与重结晶法等。 　　1.1溶剂法 　　溶剂分离法一般是将总提取物，选用三、四种不同极性的溶剂，按极性由小到大的顺序分步进行提取分离。各组分依其在不同溶剂中溶解度的差异得到分离。通过分离不同极性部分，有利于进一步结合临床或药理试验，确定有效部位，再进行逐步划分追踪，最后分离得到单体。 　　目前在研究不明成分时溶剂分离法仍最为常用。如传统的醇沉法、有机溶剂萃取法。韩金玉等[2]研究了正丁醇萃取法对三七皂若Rb3的精制作用。但这种方法操作手续繁琐，相同成分可能会分散在不同的提取部位，不易于浓集，影响药理试验的灵敏性，且较大地限制了微量成分、结构性质相似成分的分离纯化。可作为大孔吸附树脂等分离纯化手段的前处理。 　　1.2沉淀法 　　沉淀法是指在天然药物的提取液中加入某些试剂，使产生沉淀或降低溶解性而从溶液中析出，从而获得有效成分或去除杂质的方法。常用的沉淀法有试剂沉淀法。试剂产生沉淀的性质，利用某些成分在不同溶剂中溶解度的差异，通过加入特定试剂或溶剂，使生成沉淀，与其他成分分离。黄桂宽等[3]在三七茎叶皂苷提取与纯化的实验中用碱性助沉剂代替有机溶剂，利于除去大量叶绿素等杂质，大大节约成本与时间，减少环境污染，产品纯度高。 　　1.3泡沫分离法 　　泡沫分离[4]是以气泡作分离介质，利用被分离物质在气液两相界面吸附性质的差异来富集分离溶液中表面活性物质，是泡沫分离的现代研究。实验表明三七皂苷是表面活性物质，因其分子结构中亲水的配糖部分与亲脂的皂苷元所表现出的亲水性与亲脂性达到分子内动态平衡。另外，三七水溶液中还有三七多糖、三七黄酮、多种氨基酸、多肤及无机盐等，这些物质均不是表面活性物，因此可根据它们表面活性差异用泡沫吸附来富集分离三七皂苷，残余液相因没有被有机试剂污染可直接利用。王良贵等[5]对三七粗提液进行泡沫分离，实验结果表明，在pH=7.00，进料浓度2.43×102?g/ mL （以人参皂苷Rgl作参照，以下皂苷浓度均与此类同），三七皂苷的表面张力为5.93 ×102N/m2，氮气流速15mL/min及进料体积8.0mL时，对三七粗提液进行泡沫分离，泡沫相三七皂苷收率为73.6%，液相三七多糖收率为87.5%。本法具有简便、有效、无污染的优点。 　　1.4柱层析法 　　大孔树脂吸附技术是上世纪七十年代发展起来的一种新工艺，是由苯乙烯、二乙烯或a-甲基丙烯酸酷等聚合而成的高分子网状孔穴结构。药液通过大孔树脂吸附，其中的有效成分吸附在树脂上，再经洗脱回收，可除掉药液中杂质，是一种纯化精制药的有效方法。大孔吸附树脂具有吸附容量大、选择性好、易解吸、易再生、成本低、效率高等优点。国内外学者已广泛将其应用于生物碱、皂苷、黄酮等的提取，在分离、富集、纯化中药材的主要成分方面有较高的应用价值。近十余年来此技术逐渐被应用于中草药化学成分的提取分离和中药新药的开发研制[6]。 　　大孔吸附树脂为吸附和筛选原理相结合的分离材料。它的吸附性能是由于范德华引力或生成氢键的结果。筛选原理是由于其本身多孔性结构所决定。由于吸附和筛选原理，有机化合物根据吸附力的不同及分子量的大小，在大孔吸附树脂上经一定的溶剂洗脱而分开。这使得有机化合物尤其是水溶性化合物的提纯得以大大简化[7，8]。 　　大孔吸附树脂在三七皂苷的分离、富集中有较好的应用。石召华等[9]研究D101型大孔吸附树脂法纯化三七总皂苷的工艺条件及参数。方法：以三七总皂苷的量为考察指标，研究树脂吸附容量、洗脱溶媒及其用量，并用正交实验法优选最佳洗脱条件。结果：通过大孔吸附树脂纯化后，70%