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大通牦牛肺血管低氧适应组织结构特点 　　摘要：为进一步研究大通牦牛肺组织对高原低氧适应的组织学特点，选取海拔高度3 700、3 200 m地区的成年大通牦牛作为研究对象，并分别选取海拔高度3 700 m的泽库地区成年牦牛、海拔高度3 200 m的海晏地区成年牦牛作为对照，利用组织学和电镜技术对肺组织的显微、超微结构进行观测与分析。结果显示：管径大于100 μm的牦牛肺血管平滑肌含量随海拔的升高逐渐增加，差异显著（P0.05）；管径小于50 μm的牦牛肺血管平滑肌含量随海拔的升高逐渐减少，差异显著（P0.05）；牦牛肺气血屏障随海拔的升高逐渐变薄，部分差异显著（P0.05）。大通牦牛肺脏的结构特点是其能够适应高原低氧环境的组织学基础，也表现出其育种的遗传学特征。 　　关键词：高原牦牛；不同海拔；肺；低氧适应；组织学特点 　　中图分类号： S858.237.14+2文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）06-0346-02 　　收稿日期：2015-11-26 　　基金项目：国家自然科学基金（编号；青海省科技厅项目（编号：2013-Z-713）。 　　作者简介：张晶晶（1990―），女，硕士研究生，主要从事高原家畜形态学结构特点与高原环境的关系研究。E-mail：310165666@。 　　通信作者：张勤文，教授，主要从事高原家畜形态学结构特点与高原环境的关系研究。E-mail。低氧是高原环境的主要特征之一，表现为大气中的氧分压随海拔的升高逐渐降低。有学者研究表明，平原动物急进高原会引起高原性心脏病和“兽胸病”[1]，主要表现为肺动脉高压和右心肥厚。牦牛世代生活在海拔3 000～5 000 m的地区，大气中的氧含量仅为海平面地区的53%～73%。高原世居生物能够很好地适应高原低氧环境，不表现出肺动脉高压，并可通过遗传将其适应性传递给下一代。 　　肺血管的平滑肌含量显著增加是引起肺动脉高压的组织学基础，这在平原动物急进高原的研究[2]中已得到证实，但是关于高原牦牛肺血管对低氧的适应仍有学者持不同见解。有学者研究认为，牦牛的肺小动脉壁只有1层极薄的弹性层结构，并无平滑肌成分或平滑肌含量较少，低氧不会导致高原牦牛肺血管平滑肌含量增多[2-3]。但也有学者指出，成年牦牛肺动脉管壁中平滑肌的含量较为丰富，且肺动脉多数为肌性动脉[4-5]。牦牛肺动脉组织结构与高原低氧关系的研究尚有较大分歧。选取不同海拔高度下的大通牦牛作为研究对象，对其肺血管结构进行比较，旨在阐明高原牦牛肺血管随海拔升高对高原低氧环境适应的结构学特点及适应机制，研究其是否存在高原低氧环境适应的独特性，并进一步为高原医学研究提供依据。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　选取青海大通地区（海拔3 200、3 700 m）种牛场的牦牛（以下简称大通牦牛）作为研究对象，并分别选取青海海晏地区（海拔3 200 m）的高原型牦牛（以下简称海晏牦牛）、青海泽库地区（海拔3 700 m）的高原型牦牛（以下简称泽库牦牛）各5头，临床健康，不计性别。 　　1.2方法 　　1.2.1取材及样品处理所有试验牛均于放牧地现场屠宰，立即取材并固定。在每头牦牛的肺尖叶、膈叶、心叶上随机切取肺组织5块，组织块大小为1 cm×2 cm，厚度为0.5 cm。采取的组织以4%多聚甲醛固定24 h，并按常规方法包埋，4 μm 间隔连续切片后进行苏木精-伊红（H-E）染色。 　　另在右肺膈叶取1 mm3肺组织块，以2.5%戊二醛预固定后进行二次处理包埋，制成70 nm超薄切片并进行铀铅双重染色。 　　1.2.2测量与计算每例标本选5张组织切片，采用Olympus BX51型显微镜进行观察， 用图像采集系统（Olympus DP70）取图，于400倍的放大倍率下选取30个不重叠、不断裂的清晰视野。采用Image-Pro Plus 5.1图像分析系统直接测量数据。采用四点十字交叉法分别测量肺细小动脉末端直径为100 μm以上、50～100 μm、50 μm以下细小动脉的管径和中膜厚度，计算各组血管中膜厚度占血管外径的百分比，以此比值代表肺血管平滑肌含量。采用JEM-2000EX型透射电镜观察肺的气血屏障结构，并参照郑富盛的形态测量学方法[6]测量和计算气血屏障的算术平均厚度。 　　采用SPSS 11.0统计软件对试验数据和结构参数进行处理，统计结果以“平均值±标准差”（x±s）表示。对大通牦牛各结构参数进行差异显著性检验。 　　2结果与分析 　　2.13种牦牛肺血管平滑肌的含量 　　由表1可知，当肺动脉血管的管径100 μm时，牦牛肺血管平滑肌含量随海拔的升高而增加，差异显著（P100 μm、海拔高度为3 700 m时，大