实验性脑出血后血NSES100B和MBP浓度动态变化研究.docVIP

实验性脑出血后血NSES100B和MBP浓度动态变化研究 　　摘要：目的 探究急性脑出血后血清神经稀醇化酶（NSE）、S-100B蛋白和髓鞘碱性蛋白(MBP)含量的变化和临床意义。方法 选取16只小体型猪，随机分成实验组（即脑出血模型组）10只以及对照组（即假手术组）6只。使用ELISA法测定血清术后6h、1d、2d、3d、5d、7d NSE、S-100B、MBP浓度。结果 血清S-100B浓度在6h就开始升高，而NSE、MBP浓度在1d时开始升高，三者均在3d达高峰、之后开始下降，实验组1~7d血清NSE、S-100B、MBP浓度和对照组比较具有显著差异(P0.01)。结论 血清NSE、S-100B、MBP浓度联合检测能更全面的反映出脑组织的受损情况,为判断病情和预后提供了依据，为全脑保护治疗和血肿清除术（包括微创血肿清除术）提供了理论支持。 　　关键词：血清髓鞘碱性蛋白；神经元特异性稀醇化酶；S-100B蛋白1资料与方法 　　1.1实验动物及其分组本试验选取临床健康的小体型猪16只，由华中农业大学实验动物中心所提供，雌雄不限，体重（7．3±1．5）kg，在相同的饲养条件下开始试验研究。采取随机方法分成实验组(10只)及对照组(6只)。 　　1.2主要的仪器设备和试剂离心机、酶标仪（华中科技大学同济医学院免疫教研室提供），MATRX MODEL 3000型密闭式吸入麻醉机，美国Hallowell仪器有限公司生产；异氟烷及氯胺酮，麻醉诱导以及维持用药，分别是英国雅培制药与福建古田药业有限公司生产；手术器械；NSE试剂盒、MBP试剂盒、S-100B试剂盒均由美国ADL公司所提供。 　　1.3实验方法与步骤 　　1.3.1模型制作本实验组参照由孟祥武、陈兴泳等报道的猪基底节脑出血模型的制作方法[1]，使用氯胺酮复合异氟烷面罩吸入麻醉，等到气囊扩张后，自体血2次注入法建立起猪脑基底节出血模型。对照组：完成解剖定位、尾动脉抽血以及小儿导尿管插入基底，但不进行气囊扩张与注血。 　　1.3.2采集标本实验组和对照组都在6h、1d、2d、3d、5d、7d各采集尾动脉血1.5ml，使用离心机进行离心处理，10min后取出血清装在EP管内，封口。尽快保存于－70℃冰箱内。 　　1.3.3 P浓度测定1个月内严格按照说明书ELISA法测定出血清MBP、NSE、S－100B浓度。 　　1.4统计学方法采用SPSS13.0统计软件包进行统计数学处理，组间及组内比较采用重复测量数据方差分析。 　　2结果 　　血清NSE、S-100B、MBP浓度变化。 　　2.1实验组脑出血后1~7d血清NSE、S-100B、MBP浓度和对照组同时间点比较均有显著性差异(P0．01)，均在第3d达到高峰，实验组内第3d与第1d的浓度比较有显著性差异(P0．01)，其后浓度下降。 　　2.2实验组脑出血后血清S-100B蛋白浓度在发病6h内开始明显升高，血清NSE、MBP蛋白在发病24h开始明显升高，血清S-100B的浓度先与NSE、MBP浓度升高。见表1、表2、表3。动态变化曲线见图1、图2、图3。 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　 　　3讨论 　　NSE、S-100B和MBP被认为对中枢神经系统损伤具有高度的特异性，目前在脑外伤及缺血性脑中风的研究中应用得比较多,对预后评估具有十分重大的意义，从而受到高度重视[2]。脑内生理S-100B主要是由活化的星形胶质细胞所产生;NSE特异地存在于脑神经细胞和神经内分泌细胞;MBP在CNS是由少突胶质细胞（OLs）合成，是脑白质的重要组成部分，它是功能上很重要的髓鞘结构蛋白。 　　在中枢神经系统中,星形胶质细胞的数量远远超过了神经元,星形胶质细胞不仅为神经元提供代谢和营养支持,而且在调节突触功能、保护神经元存活、神经修复以及神经再生中起着十分重要的作用。其终足包绕着毛细血管,所以,脑损伤后后星形胶质细胞最先开始遭受到打击[3]。在缺血性损伤下,星形胶质细胞通常情况下会出现细胞肿胀,过度肥大增生以及增殖反应,并还会出现反应性星形胶质细胞化[4]。在反应性星形胶质细胞化之后,出现明显的星形胶质细胞死亡,且垂死的星形胶质细胞还可能会进一步杀死相邻的细胞[5]。虽然在大量离体实验中，星形胶质细胞较神经元更能承受缺血打击,但是在体情况下发生脑缺血后星形胶质细胞可能会比神经元更容易受损，因此S-100B的浓度更早于NSE、MBP的浓度升高。本实验结果与上述结论一致。少突胶质细胞(OLs)形成的髓鞘是脑白质的重要组成部分。脑出血后血清MBP浓度明显升高，说明脑白质明显受损，因此临床上我们要重视全脑保护治疗，既要重视神经元的保护治疗，又要重视胶质细胞的保护治疗。 　　本文资料显示,脑出血