TLR2和TLR4激动剂对人骨髓来源的间充质干细胞迁移能力的影响-内科学(血液病)专业论文.docxVIP

PAGE PAGE 1 英文缩略词表 英文简称 英文全称 中文释义 CSF Colony-stimulating factor 集落刺激因子 FN Fibronectin 纤维连接蛋白 GVHD Graft versus host disease 移植物抗宿主病 HSCs Hematopoietic stem cells 造血干细胞 HSPCs Hematopoietic stem/progenitor cells 造血干祖细胞 HLA Human leukocyte antigen 人类白细胞抗原 IL Interleukin 白细胞介素 LPS Lipopolysaccharide 脂多糖 MNCs Mononuclear cells 单个核细胞 MSCs Mesenchymal stromal cells 间充质干细胞 PAMPs Pathogen-associated molecular patterns 病原相关分子模式 SCF Stem cell factor 干细胞因子 TLRs Toll-like receptors Toll 样受体 TLR2 和 TLR4 激动剂对人骨髓来源的间充质干细胞 迁移能力的影响 中文摘要 背景和目的：Toll 样受体（Toll-like receptors，TLRs）是一类天然免疫受体，在天 然免疫及获得性免疫过程中均发挥非常重要作用。对 TLRs 的进一步研究表明， TLRs 同样表达于多种非免疫细胞，并发挥一定生物学效应。我们的前期研究已 证实，人骨髓来源的间充质干细胞（mesenchymal stem cell,MSC）表达 TLR2 和 TLR4，并参与调控 MSC 的造血支持功能。本研究利用 TLR2 激动剂（PAM3CSK4） 和 TLR4 激动剂（LPS）体外活化人骨髓来源的 MSC，观察 TLR2 和 TLR4 的活 化对 MSC 迁移能力的影响，并对其机制进行初步研究。 方 法 ： 应 用 Ficoll 法 体 外 分 离 培 养 健 康 供 者 的 骨 髓 来 源 的 间 充 质 干 细 胞 （BM-MSC），流式细胞仪检测人骨髓间充质干细胞表面 CD29 、CD44 、CD49e 、 CD90 、CD105、CD166 ，CD14、CD34、CD31、CD45 和 HLA-DR 的表达，鉴 定人骨髓来源的 MSC。利用流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面 TLR2 及 TLR4 的表达情况。趋化实验和粘附实验观察 PAM3CSK4（TLR2 激动剂）和 LPS（TLR4 激动剂）对人骨髓来源的 MSC 的趋化活性和粘附活性的影响. 结果：人骨髓 MSC 培养至第三代，流式细胞仪检测表达 CD29 [(94.3±5.2)%]、CD44 [(62.6±14.9)%]、CD49e [(92.2±3.9)%]、CD90 [(93.9±6.1)%]、CD105 [(90.9±4.0)%] 和 CD166 [(95.2±5.1)%]，不表达 CD14、CD34、CD31、CD45 和 HLA-DR。符合 MSC 的形态和表型特征。人骨髓来源的 MSC 表面表达 TLR2（24.5±3.2）%和 TLR4 （91.3±5.2）%。与对照组相比，PAM3CSK4 可明显抑制 SDF-1 诱导的 MSC 的趋 化作用，并增强 MSC 的粘附作用；而 LPS 对 MSC 的趋化和粘附能力均无明显影 响。进一步研究显示，PAM3CSK4 可呈剂量依赖性抑制 MSC 的自发迁移作用， 但对 MSC 表面 CXCR4 的表达无明显影响。 结论: TLR2 的活化可显著抑制 MSC 的迁移能力，这可能与其抑制 MSC 的自发迁 移和增强 MSC 的粘附作用具有一定的关系。 关键词 TLR2；TLR4；MSCs；趋化；黏附 Influence of TLR2 and TLR4 agonists on migration of human mesenchymal stem cells Abstract Background and objective: Toll-like receptors (TLRs), as innate immune receptors, play critical roles in both innate immune response and adaptive immunity process. Further studies showed that TLRs are also expressed in a variety of non-immune cells and modulate their biological functions. Our pr