T细胞转录因子基因与葡萄膜炎遗传易感性研究-眼科学专业论文.docxVIP

重庆医科 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 英文名称 中文名称 VKH Vogt-Koyanagi-Harada syndrome Vogt-小柳原田综合征 BD Behcets disease 白塞氏病 PBMCs Peripheral blood mononuclear cells 外周血单个核细胞 ELISA Enzyme-linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附试验 SNP Single nucleotide polymorphism 单核苷酸多态 PCR-RFLP Polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism 聚合酶链式反应-限制性 片段长度多态性 CNV Copy number variation 拷贝数变异 Real-time PCR Real time-Polymerase chain reaction 聚合酶链反应 Treg cells Regulatory T cells 调节性 T 细胞 PBS Phosphate Buffered Saline 磷酸盐缓冲液 LPS Lipopolysaccharides 脂多糖 1 T 细胞转录因子基因与葡萄膜炎遗传易感性 研究 摘要 目的 本研究旨在探讨 T 细胞转录因子 TBX21、GATA3、Rorc 和 Foxp3 基因遗传变异（单核苷酸多态性、拷贝数变异）与中国汉族人群 Behcet 病和 VKH 综合征遗传易感性的相关性。 方法 本研究采用两阶段关联分析策略。SNP 位点采用 Sequenom 方法和 限制性片段长度多态性聚合酶链反应（PCR-RFLP）技术进行分型。我 们采用 ABI7500 实时荧光定量程序进行样本 TBX21、GATA3、Rorc 和 Foxp3 基因拷贝数检测和 mRNA 表达水平检测，ELISA 法检测细胞 因子水平。 结果 高 Rorc 拷贝数（Rorc2）与 Behcet 病易感性相关（P=8.99×10-8， OR=3.0，95%CI 2.0-4.6）。在女性中，低 Foxp3 拷贝数（Foxp32）与 Behcet 病易感性相关（P=1.92×10-5，OR=3.1，95%CI 1.8-5.2）。TBX21、 GATA3、Rorc 和 Foxp3 基因拷贝数变异与 VKH 综合征遗传易感性无 2 相关性。进一步功能实验发现高 Rorc 拷贝数（Rorc2）的个体有 Rorc mRNA 的高表达，结果具有统计学意义（P=7.40×10-5）。但是在不同 Foxp3 基因拷贝数的个体之间，Foxp3 mRNA 的表达无统计学差异。高 Rorc 拷贝数（Rorc2）的个体比 Rorc≤2 的个体具有高表达的 IL-1β 和 IL-6 水平。本研究纳入的 25 个 SNP 位点基因型和等位基因频率在 Behcet 病患者和正常对照、VKH 综合征和正常对照之间没有统计学差 异。 结论 本研究表明 Rorc 和 Foxp3 基因拷贝数变异与 Behcet 病的发病风 险显著相关。Rorc 拷贝数变异影响 Behcet 病的发病风险机制可能是通 过调控 Rorc mRNA 表达以及影响促炎细胞因子 IL-1β 和 IL-6 的产生来 实现。 关键词：Behcet 病，VKH 综合征，转录因子，拷贝数变异 3 Copy Number Variants and Genetic Polymorphisms in TBX21, GATA3, Rorc, Foxp3 and Susceptibility to Behcet’s Disease and Vogt-Koyanagi-Harada Syndrome ABSTRACT Objective Dysregulations of T-bet/GATA3 and Rorc/Foxp3 ratios play critical roles in the pathogenesis of uveitis. However, their genetic role in uveitis remains unclear. This study aimed to investigate the role of genetic variants including single nucleotide polymorphisms (SNPs) and copy