WAS蛋白缺陷对调节性B细胞的影响及不典型重症联合免疫缺陷病临床研究-儿科学专业论文.docxVIP

重庆医科 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 BCR 英文全称 B cell receptor 中文全称 B 细胞受体 BFA Brefeldin A 蛋白转运抑制剂 cDNA Complementary deoxyribonucleic acid 互补脱氧核糖核酸 CD40L CD40 ligand CD40 配体 DNA Deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 FCM Flow cytometry 流式细胞术 g Acceleration of gravity 重力加速度 gDNA Genomic DNA 基因组脱氧核糖核酸 h Hour 小时 Iono Ionomycin 离子霉素 IFN-γ IL-10 Interferon γ Interleukin 10 γ 干扰素 白介素 10 L Litre 升 LPS Lipopolysaccharide 脂多糖 mon Month 月 mg Milligram 毫克 min Minute 分钟 mL Millilitre 毫升 PBMCs Peripheral blood mononuclear cells 外周血单个核细胞 PBS Phosphate-buffered saline 磷酸盐缓冲液 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链反应 PIDs Primary immunodeficiency diseases 原发性免疫缺陷病 PMA Phorbol 12-myristate 13-acetate 佛波酯 RNA Ribonucleic acid 核糖核酸 rpm Round per minute 每分钟转速 s Second 秒 1 TCR Th1 T cell receptor Type-1 helper T cells T 细胞受体 1 型 T 辅助细胞 Treg Regulatory T cells 调节性 T 细胞 μL Microlitre 微升 WAS Wiskott-Aldrich syndrome Wiskott-Aldrich 综合征 w Week 周 WASp Wiskott-Aldrich syndrome protein Wiskott-Aldrich 综合征蛋白 XLT y X-linked thrombocytopenia Year X 连锁血小板减少症 岁 2 WAS 蛋白缺陷对调节性 B 细胞的影响及不典型重 症联合免疫缺陷病临床研究 摘 要 第一部分 WAS 蛋白缺陷对调节性 B 细胞的影响 目的：探究 WAS 蛋白（Wiskott-Aldrich syndrome protein, WASp） 缺 陷 对 调 节 性 B 细 胞 （ B10 ） 的 影 响 ， 以 及 调 节 性 B 细 胞 在 Wiskott-Aldrich 综合征并发自身免疫中的潜在作用。 方法：利用流式细胞术，检测 WASp KO 小鼠外周不同组织 B10 细胞的比例变化，同时检测 WAS 患儿外周血中 B10 细胞及 B10+B10pro 细胞的比例变化。利用年老 WASp KO 小鼠发生自身免疫性结肠炎这一 宝贵的非诱导性自身免疫模型，检测 B10 细胞和调节性 T 细胞及 Th1 细胞比例变化，探讨 B10 细胞与 Treg/Th1 平衡的关系。 结果：WAS 患儿外周血 B10 细胞比例为 0.75±0.29（n=9），显著 低于对照组 2.01±0.60（n=14）（P=0.0002）；B10+B10pro 细胞比例为 1.09±0.58（n=6），显著低于对照组 2.65±0.58（n=9）（P=0.0004）。 WASp KO 小鼠的外周血、腹腔、脾脏、淋巴结中 B10 细胞比例分别为 1.20±0.65（n=7）、10.72±5.05（n=6）、0.71±0.17（n=7）、0.74±0.16 （n=6），对比 WT 小鼠相应比例 2.06±0.43（n=7）、22.51±6.69（n=7）、 1.52±0.80（n=7）、1.89±0.47（n=5），均显著下降（P0.05）。年老 WASp KO 小鼠的外周血、腹腔、脾脏、淋巴结中 B10 细胞比例分别为 3 1.35±0.64（n=6）、8.30±3.90（n=6）、0.90±0.16（n=6）、0.57±0.25 （n=3），对比年老 WT 小鼠相应比例 1.82±0.69（n=8）、15.81±6.87 （n=9）、1.49±0.35（n=7）、1.41±0.40（n=7），除外周血无差别外 （P=0.2284），均有显著下降（P0.05）。年老 WASp KO 小鼠腹腔和肠 系膜