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对维生素C含量测定实验探讨 　　摘 要：文章对“维生素C的含量测定”实验做了总结和改进，包括对维生素C的正确定义，实验取材，提取液制备，测定方法的选择等，以提高该实验的教学效果。 　　关键词：维生素C；L-抗坏血酸；实验教学；改进 　　中图分类号Q547 文献标识码A 文章编号1007-7731（2014）14-35-02 　　 　　Discussion on the Experiment of “Determination of Vitamin C Content” 　　 Zha Lingsheng1 et al. 　　（1School of Life Sciences，Huaibei Normal University，Huaibei 235000，China） 　　Abstract:Paper takes a summary to the experiment of“Determination of Vitamin C Content”，and provides some improvement steps and advice which include correct definition of Vitamin C，material selection，extract preparation，method selection and etc. It could improve the effect of its exprement teaching. 　　Key words:Vitamin C；L（+）-Ascorbic acid；Expriment teaching；Improvement 　　 　　1 概念 　　维生素C（Vitamin C，Vc），又称L-抗坏血酸。天然存在的抗坏血酸有L型（L-抗坏血酸）和D型（脱氢抗坏血酸）2种。维生素C脱去2个H后成为氧化型的脱氢抗坏血酸，当有供氢体存在时，脱氢抗坏血酸又可变为还原型的L-抗坏血酸，所以脱氢抗坏血酸仍有维生素C的生理活性[1-3]。值得注意的是维生素C是指L-抗坏血酸，而非等同于抗坏血酸，有些文献及教材[3-4]中将两者混为一谈。 　　2 Vc的稳定性 　　所有绿色植物都能合成维生素C，人类自身不能合成维生素C，必须通过食物（主要是新鲜水果和蔬菜）获取。维生素C在酸性环境中稳定，遇空气中氧、热、光、碱性物质，特别是由氧化酶及铜、铁等金属离子存在时，可促进其氧化破坏。水果蔬菜中的抗坏血酸主要以L-抗坏血酸为主，氧化酶一般在蔬菜中含量较多，故蔬菜储存过程中都有不同程度流失。但在某些果实中含有的生物类黄酮，能保护其稳定性[3]。因此实验取材要用新鲜的植物材料。 　　3 实验取材 　　实验取材时要考虑3个重要因素：（1）维生素C在植物组织中含量很低，因此要尽量选择维生素C含量高的材料；（2）尽量不要选择色素含量高，维生素C难以提取的材料；（3）植物组织的幼嫩组织（如叶片，叶尖等）维生素C含量相对较高[2]，提取起来也比较容易。笔者多年教学经验发现，新鲜的青椒、松树的松针、鲜枣、猕猴桃等材料较适合实验教学。 　　4 提取液制备 　　（1）溶解液。草酸廉价易得，有与磷酸相近的稳定性，注意的是草酸不应置于日光下，以免产生过氧化物，当有催化剂（如Cu2+）存在时，过氧化物能破坏Vc。而醋酸适于浸提含有Fe2+的样品。偏磷酸是Vc的最佳稳定剂，且具有沉淀蛋白质的作用，但其价格较贵，在室温下放置易转化为正磷酸，降低对Vc的稳定性。（2）组织捣碎。尽量用组织捣碎机（或匀浆机）代替人工研磨的操作。（3）去杂。除去植物组织中的纤维素、叶绿素及沙土等杂质，可选择4 000r/min转速下离心5～10min，操作简单、时间短且效果佳。尽量摒弃原始的纱布过滤法，操作麻烦且误差大。 　　5 维生素C的测定 　　目前维生素C的测定方法很多，对常见的一些方法做了比较如表1。 　　表1 维生素C含量测定的几种不同方法比较 　　[方法\测定对象\主要仪器\注意事项\主要操作技能\2，6-二氯 　　靛酚法[5-7]\Vc \组织捣碎机，离心机，电子天平，滴定管\2，6-二氯靛酚染料不易放久；不适于色素难以去除的材料\组织捣碎，离心，定容，滴定\碘滴定法[7]\Vc\组织捣碎机，离心机，电子天平，滴定管\不适于色素难以去除的材料；滴定操作要快\组织捣碎，离心，定容，滴定\磷钼酸法[5]\Vc\组织捣碎机，离心机， 电子天平，可见分光光度计\快速、准确、灵敏度高；数据稳定性、准确性较好；对样液颜色影响小；分光计的操作误差\组织捣碎，离心，定容，可见分光光度计\2，4-二硝基 　　苯肼法[4，6，8]\总抗坏血酸\组织捣碎机，离心机， 电子天平，可见分光光度