Stathmin在肝细胞癌中的表达及其意义-内科学(消化系病)专业论文.docxVIP

华中科技大学硕士学位论文 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 I I Stathmin 在肝细胞癌中的表达及其意义 华中科技大学同济医学院附属同济医院肝病研究所 研究生：董旭旸 导 师：林菊生 中文摘要 目的 研究 Stathmin mRNA 和蛋白在肝细胞癌中的表达情况及其与肝癌临床病理特 征的关系，为其作为一个潜在的 HCC 基因治疗的新的分子靶点提供实验依据。 方法 1．应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术检测 33 例肝癌患者的肝癌组织、 相应癌旁组织中 Stathmin mRNA 的表达水平。 2．应用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法（S-P 法）检测 上述组织中 Stathmin 蛋白的表达情况。 3．应用 Western-blot 技术检测上述组织中 Stathmin 蛋白的表达水平。 4．分析 Stathmin 表达水平与肝癌临床病理特征的关系。 结果 1．33 例肝癌组织中有 18 例 Stathmin mRNA 阳性表达，阳性率为 54.5%；33 例癌旁组织中 3 例 Stathmin mRNA 阳性表达，阳性率为 9.1%，两者间有显 著的差异（P＜0.01）。 2．Stathmin免疫组化阳性染色为棕黄色，主要位于细胞的胞浆中，未见胞核着 色。肝癌细胞中的阳性染色呈粗大颗粒状或团块状，癌旁组织则染色浅淡、 弥散，呈雾状，明显弱于肝癌组织。间质细胞（成纤维细胞、内皮细胞等） 未见明显阳性染色。肝癌组织Stathmin蛋白阳性表达率为51.5%，癌旁组织 阳性表达率仅为6.0%，两者间有显著性差异（P＜0.01），与RT-PCR结果具 有一致性。 II II 3．Western 印迹发现在 19KDa 处有一特异性条带，33 例肝癌组织中 19 例可见 明显条带，相应癌旁组织仅 2 例可见条带。肝细胞癌中 Stathmin 蛋白的表 达率为 57.6%，癌旁组织为 6.0%，差异显著（P＜0.01），与免疫组化的结 果一致。 4．对 Stathmin 表达与临床资料的统计分析发现，Stathmin 过表达与年龄、性 别无关，而与肿瘤大小、门脉受侵、TNM 分期及 Edmondson 分级有关（P ＜0.05）。直径≥5cm、有门脉受侵、低分化、恶性程度高的肝癌其 Stathmin 表达率明显高于直径＜5cm 、无门脉受侵、高分化、恶性程度低的肝癌。 结论 Stathmin mRNA 及其蛋白在肝癌组织中的表达水平显著高于相应癌旁组织，提 示其可能与肝癌的发生、进展及转移潜能有关，有望成为肝癌分子治疗的新的 靶点。 关键词：肝细胞癌； Stathmin；基因治疗 PAGE PAGE IV The Expression of Stathmin in hepatocellular carcinoma and its Clinical Significance Institute of Liver Diseases, Affiliated Tongji Hospital, Tongji Medical College, Hua-Zhong University of Science Technology Postgraduate: Xu-yang Dong Tutor: Ju-Sheng Lin Abstract Objective To study the expression of Stathmin mRNA and protein in hepatocellular carcinoma (HCC) tissues and to explore the relationship between the expression of Stathmin and clinical pathological features of HCC. Methods The expression of Stathmin mRNA in primary HCC (n=33) and their corresponding adjacent tissues was detected by semi-quantitative reverse-transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). The expression of Stathmin protein was observed in preceding tissues by immunohistochemical staining and western-blot. Then，the expression difference and clinicopathological si