Talin1与原发性肝癌的侵袭和迁移-外科学(普外)专业论文.docxVIP

目录 主要英文缩写一览表1 中文摘要2 英文摘要5 论文正文 Talin1 与原发性肝癌的侵袭和迁移 前言 6 .材料与方法 9 2.结 果 22 3.讨 论 31 4.结 论 34 参考文献 35 附录43 致谢44 综述45 安徽 安徽医科大学硕士学位论文 1 1 英文缩略词对照表 Abbreviation 英文缩写 英文全称 中文全称 HCC Hepatocellular carcinoma 肝细胞癌 PLC Primary liver cancer 原发性肝癌 DMEM Dulbeccos Modified Eagles Medium DMEM 培养液 PBS Phosphate Buffer Saline 磷酸盐缓冲液 DMSO Dimethyl Sulfoxide 二甲基亚砜 FBS Fetal Bovine Serum 胎牛血清 mRNA messenger ribonucleic acid 信使核糖核苷酸 PCR Polymerase chain reaction 聚合酶链反应 Real time RT-PCR Real time Reverse Transcriptase-PCR 实时定量逆转录-聚合酶 链反应 GAPDH Glyceraldehyde phosphate dehydrogenase 磷酸甘油醛脱氢酶 Western-blot 蛋白印迹 DAB Diaminobenzidine 二氨基联苯胺 FAP Focal adhesion plaque 粘着斑 FAK Focal adhesion kinase 粘着斑激酶 ECM Extracellular matrix 细胞外基质 DEPC Diethyl pyrocarbonate 二乙基焦磷酸酰胺 TLN Talin 踝蛋白 FAT Focal adhesion targeting 粘着斑靶向序列 ILK Integrin-linked-kinase 整合素连接激酶 Cas Crk-associated substrate CrK 相关底物 Grb2 Growthfactor receptor-bound protein2 生长因子受体结合蛋白 2 PAGE PAGE 2 Talin1 与原发性肝癌的侵袭和迁移 中文摘要 目的：通过体外培养不同来源人肝癌细胞株及人正常肝脏细胞株，模拟人原发性 肝癌的不同组织学亚型及人正常肝脏模型，检测talin在各细胞株中的表达差异及 各细胞株侵袭和迁移能力，探讨talin与不同来源人肝癌细胞侵袭及迁移的关系， 进而为进一步研究talin与肝癌的侵袭和迁移的可能机制提供理论基础。 方法：体外培养人高转移肝癌细胞株（MHCC-97H细胞株）、人低转移肝癌细胞株 （MHCC-97L细胞株）、人肝癌SMMC-7721细胞株、人肝癌BeL-7402细胞株、人肝癌 HePG-2细胞株及人正常肝脏细胞株（LO2细胞株），至对数生长期，利用RT-PCR 技术检测各细胞株中talin-1的mRNA表达水平，Western-blot技术检测各细胞株中 talin-1的蛋白表达水平，Transwell侵袭和迁移实验及细胞划痕实验检测各细胞株 侵袭及迁移能力，软琼脂集落形成实验检测各细胞株增殖和克隆能力。 结果：五种人肝癌细胞株中Talin-1的mRNA表达水平不同（P0.05），与正常人 肝脏细胞相比， MHCC-97L 细胞株中 Talin-1 的 mRNA 表达比 LO2 细胞株高 （P0.0001），MHCC-97H细胞株和SMMC-7721细胞株中Talin-1的mRNA表达比 LO2细胞株低，但不具有统计学意义（P0.05），Bel-7402细胞株和HePG-2细胞株 中Talin-1的mRNA表达比LO2细胞株低（P0.0001）；五种人肝癌细胞株中Talin-1 蛋白表达水平和mRNA表达相似，MHCC-97L细胞株中Talin-1的蛋白表达比LO2 细胞株高（P0.05）；五种人肝癌细胞株的侵袭能力不同（P0.05），与正常人肝 脏细胞相比，高表达talin-1的MHCC-97L细胞株侵袭能力较低（P=1.0000），低表 达talin-1的Bel-7402细胞株和HePG-2细胞株侵袭能力强（P0.05），MHCC-97H 细胞株和SMMC-7721细胞株介于两者之间(P=0.091和 0.092，0.05)；与正常人 肝脏细胞相比，五种人肝癌细胞株的迁移能力不同（P=0.0000），高表达talin-1 的 MHCC-97L 细 胞 株 迁 移 能 力 较 低 （ P=0.052 ， 0.05 ）， Bel-7402 细 胞 株 、 SMMC-7721 细胞株、 HeP