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洗洁精对水生动物毒害机理探究及建议 　　文件编号：1003―7586(2010)04―0042―02 　　 　　1　课题提出 　　 　　洗洁精具有高效去油力，泡沫细腻丰富，清爽护手，成本低廉的特点。人们几乎每天都要用洗洁精来清洗水果、蔬菜和餐具。而当使用后，洗洁精流入江河湖泊。它对江河中的鱼类及动物会产生毒害影响吗?因此希望通过实验，对所提出的问题加以证明，初步探究其致害机理，希望能对洗洁精成分配方进行改进。 　　 　　2　材料与方法 　　 　　2.1　实验仪器 　　1000mL量筒，10mL量筒，移液管，100mL量杯，玻璃棒，计数器，吸液球，规格为长、宽、高分别为20cm、20cm、40cm玻璃容器，规格为长、宽、高分别为10cm、10cm、20cm的玻璃容器，金鱼网，解剖刀，解剖盘，解剖剪，解剖针，耗氧量测试瓶和实验相关化学仪器及药品。 　　 　　2.2　洗洁精 　　市售的雕牌洗洁精，主要成份：直链烷基苯磺酸钠、十二烷基硫酸钠、烯烃磺酸钠、脂肪醇聚氧乙烯醚硫酸钠、烷基醇酰胺、烷基糖苷、烷基甜菜碱等。 　　 　　2.3　自来水的去氯处理 　　先用大型铁桶装上自来水，然后用一层纱布和橡皮筋将桶口封住。随后在一个通风、透光的地方放置3d以上，除去自来水中的余氯。 　　 　　2.4　实验动物 　　金鱼是一种较为常见的实验用鱼。本实验采用的金鱼是孵化后180d后的清洁级金鱼，雌雄不拘。实验鱼必须健康，判断的标准为体形正常，鳞片完整，各鱼鳍舒展无缺陷，体色光亮，行动活泼，反应灵敏，食欲好，大小基本一致，外观上没有异常现象。 　　 　　驯养30d，驯养总数为150条以上，驯养期间每天投少量不影响水质的饵料。当其死亡率在10％以下时，才可开始实验。 　　 　　2.5　半数致死浓度的测定 　　实验液的配制：这个实验一共要配制两次实验液。第一次配制9个不同的洗洁精浓度梯度，分别编号为1～9，以初步找出大致致死范围。1～9号缸内的实验液的浓度分别为：10％、1％、0.1％、0.01％、0.001％、0.000 1％、0，00001％、0.000001％、0％。第二次是在上述实验找出大致致死浓度后，在上述全部致死最低浓度和全部不死的最高浓度之间配制十个等差浓度，分别编号为A～J，再加上0％的空白进行对照，编号为K，求出半致死浓度。 　　放入实验鱼：配制好实验液之后，把金鱼转移到各实验组的容器中，每个缸内五条金鱼。30min后，待金鱼已经完全适应其新环境后，开始计时观察，并进行记录。 　　实验的时间：实验总时间为48h，其中前12h作连续性的观察，后36h内随时进行观察，记录下每组实验鱼死亡的时间。 　　金鱼死亡的判断：金鱼停止了呼吸运动，用小镊子或玻璃棒夹鱼的尾柄部(鱼体接近尾鱼鳍的部分)在5min内没有产生刺激反应则可断为死亡。第二次的实验数据用以下公式计算出半数致死浓度：半数致死浓度=(全部致死的最低浓度+全部存活的最高浓度)／2。 　　 　　2.6　实验鱼生理指标的测定(以空白组与半数致死浓度组对比) 　　2.6.1　实验液的配制 　　按照计算出的半数致死浓度重新配制实验液。 　　2.6.2　放入实验鱼 　　把实验鱼分别放入清水(对照组)和半数致死浓度的(实验组)①、②号实验容器里面，每个缸内放五条金鱼，实验时间为48h。 　　2.6.3观察记录 　　每4h观察一次，内容有呼吸频率、体表和运动情况和对刺激(用玻棒敲击鱼缸)的反应。 　　 　　2.7　解剖 　　对上述各级实验后的鱼进行解剖，观察的项目有内脏的颜色、体表、眼球、鳃丝等的变化。 　　 　　2.8　实验鱼耗氧量测定 　　将对照组、半数致死浓度组放入广口瓶中，30min后，加上橡皮塞(瓶内不留空气)，将其和未放鱼的空白瓶(清水瓶和半数致死浓度洗洁精瓶)，30℃恒温放置1h；分别利用定碘法将以上瓶中水的含氧量测出，再利用两个空白瓶的含氧量，分别求出两组实验鱼的耗氧量，公式如下：实验鱼耗氧量=(空白瓶水含氧量一实验瓶水含氧量)／鱼的重量x放置时间。 　　 　　3　结果 　　 　　该实验的记录结果如表1。 　　3.1　呼吸频率的观察 　　从表中可见，两组鱼的呼吸频率差异明显。 　　3.2　生理、行为改变的观察 　　在该实验中1号缸内的金鱼未发生生理行为的变化，2号缸内的鱼却有很明显的改变。大致归纳如下：刚放入实验鱼时，两组鱼呼吸频率均正常，平均45次／min，反应敏捷，遇到刺激金鱼会马上散开或四处乱窜；游动的速度和体色都无异常。随后20h中实验组的金鱼出现浮头现象，并且鱼肚微有肿胀。这时金鱼的呼吸次数有大幅度的上升，变为了80次／min。再过8h后金鱼又有了一次转折性的变化，呼吸次数由多变