子痫前期患者血清及尿液中sflt-1plgf值的变化-changes of sflt - 1 plgf in serum and urine of preeclampsia patients.docxVIP

山西 山西医科大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 前 言 妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy , HDCP)是 严重危害母婴健康的妊娠期并发症，是妊娠期特有的多脏器损伤的疾病，是孕产妇和围产 儿死亡的主要原因之一，也是医源性早产的主要原因[1]。发病率为 7-12％。由于妊娠期高 血压疾病的病因及发病机理尚未完全明了，对其进行积极的预防和治疗仍然存在一定的局 限性，因此病因学始终是妇产科领域的研究热点。 从妊娠期高血压疾病的基本病理生理来看，其发生、发展与患者全身小动脉痉挛，全 身各系统各脏器血流灌注减少有着直接的关系，体内多种因素影响这一病理生理改变的发 展过程。发病机理尽管有多种学说：[2]（1）血管内皮细胞受损学说（2）胎盘浅着床学说 （3）免疫机制学说（4）遗传因素学说（5）氧化应激学说；其中血管内皮细胞受损学说 已成为妊娠期高血压疾病病因研究的焦点，近年来众多研究表明该类疾病与滋养细胞对子 宫螺旋动脉浸润不足、血管重铸障碍致胎盘浅着床，引起胎盘缺血缺氧，血管下内皮损伤 有关，而内皮细胞损伤则是导致妊娠期高血压疾病发病的最终通路和重要环节，血管内皮 细胞损伤和胎盘浅着床是妊娠期高血压疾病发病的中心环节[3].因此，滋养细胞和血管内皮 细胞发挥正常功能，在正常妊娠时胎盘形成和发育中起着关键的作用，胎盘生长因子与其 受体结合在调节滋养细胞生长和内皮细胞功能方面有重要作用[4-6]。子痫前期患者胎盘生长 因子及其受体表达异常，可能在妊娠期高血压疾病内皮细胞损伤中起了重要作用。目前国 内外有关 PLGF 与子痫前期关系的报道较多，成为很多学者关注的热点。 为此本课题选择 PLGF（胎盘生长因子）及其受体 sFlt-1（可溶性络氨酸激酶受体 1） 为研究指标，通过酶联免疫吸附(ELISA)实验，研究子痫前期患者血清及尿液中 PLGF（胎 盘生长因子）与 sFlt-1（可溶性络氨酸激酶受体 1）水平变化，探讨血清及尿液中 sFlt-1/PLGF 比值的变化与子痫前期病情程度的关系，以及血清中 PLGF、sFlt-1 与尿液中 PLGF、sFlt-1 水平的相关性。进一步阐明妊娠期高血压疾病病理生理机制，为临床上子痫 前期的预防和治疗提供新的思路和方法。 材料与方法 1 研究对象 1.1 研究对象：受试者为 2008 年 3 月至 2009 年 3 月在山西医科大学第一临床医院产科 剖宫产分娩的产妇 65 例作为研究对象，年龄 24-46 岁，孕周 30-41 周，其中轻度子痫前 期 25 例，重度子痫前期 20 例，诊断和分类标准根据《妇产科学》第 7 版。选择同期正常 妊娠妇女 20 例作为对照组，正常妊娠组妇女均因骨盆狭窄、胎儿窘迫、瘢痕子宫和高龄 初产等指征行剖宫产分娩。除重度先兆子痫组孕妇孕龄小于其它组外，各组年龄、孕周差 异无显著性，均为单胎，且均无其他妊娠合并症及并发症，且均无甲状腺功能亢进、原发 性糖尿病等疾病。 1.2 收缩压和动脉压的测定：入院未治疗前的收缩压及舒张压。 1.3 平均动脉压的测定：妊娠期高血压疾病各组和对照组均根据入院后所检测的未治 疗前的收缩压及舒张压计算平均动脉压: 平均动脉压(MAP)＝(收缩压+舒张压×2)÷3。 1.4 尿蛋白的测定：妊娠期高血压疾病各组和对照组均于入院后未进行药物治疗前按 常规方法收集尿液送检。 2 标本采集与处理 所有孕妇在分娩前采集空腹全血标本 4ml, 室温下静置 2-3h 后，经 4℃低温 3000rpm 离心 10 min 吸取血清每管 50ul 分装于 EP 管中,置-80℃冰箱保存。同时采集孕妇随意中 段尿液 5ml, 经 4℃低温 3000rpm 离心 10 min 吸取上清液每管 50ul 分装于 EP 管中,置-80℃ 冰箱保存。 3 实验试剂及仪器 3.1 血清 PLGF 水平的测定：ELISA 试剂盒，由深圳晶美生物公司提供。 试剂盒内备有： 1)PLGF 标准品 2)标准品稀释液 3)酶标包被板 4)酶标试剂 5)30 倍浓缩洗涤液 6)样品稀释液 )显色剂 A 液 )显色剂 B 液 9)终止液 10)说明书 11)封板胶纸 所有试剂同批次，试剂抗体与人 VEGF-165、VEGF-121 等无交叉反应，板内变异系数 ＜5％，操作按试剂盒提供说明书进行。 3.2 血清 sFlt-1 水平测定：ELISA 试剂盒，由深圳晶美生物公公司提供。 试剂盒内备有： 1)sFlt-1 标准品 2) 标准品稀释液 3) 酶标包被板 4) 酶标试剂 5) 30 倍浓缩洗涤液 6)样品稀释液 7) 显色剂 A 液 8) 显色剂 B 液 9) 终止液 10)说明书 11)封板胶纸