不同理化性质溶液灌注食管对豚鼠气道的影响及机制探讨-呼吸内科学专业论文.docxVIP

广州医学院硕士学位论文不同理化性质溶液灌注食管对豚鼠气道的影响及机制探讨 广州医学院硕士学位论文 不同理化性质溶液灌注食管对豚鼠气道的影响及机制探讨 PAGE PAGE 10 不同理化性质溶液灌注食管对豚鼠气道的 影响及机制探讨 中文摘要 研究背景及目的 日常生活和临床工作中常见饮食因素可诱发或加重咳嗽的现象，其中是否存 在科学根据尚不明确。近年来研究发现酸刺激食管可以诱导气道神经源性炎症， 这一过程主要是通过非肾上腺素能非胆碱能神经(nonadrenergic noncholinergic, NANC)通路及其神经肽介导的，涉及的神经肽主要为P物质(Substance P, SP)等。 研究表明食管与气管之间存在迷走神经介导的食管-支气管反射通路。除了酸刺 激，目前国内外未见其他理化因素刺激食管对气道炎症影响的相关报道。本研究 通过给豚鼠食管单次灌注不同理化性质溶液，观察其对气道炎症的影响，并探讨 食管-支气管反射及其相关的气道神经源性炎症的作用。 结果 1. 冷、热和乙醇溶液灌注豚鼠食管可以诱导气道的血浆渗出，神经内肽酶抑制 剂磷阿米酮显著增加热刺激食管诱导的气道血浆渗出，SP 受体拮抗剂 FK888 显著抑制冷、热和乙醇刺激食管诱导的气道血浆渗出。 2. 冷、热和乙醇溶液灌注豚鼠食管引起气道 SP 释放增加，神经内肽酶抑制剂磷 阿米酮显著增加热刺激食管引起的 SP 释放，SP 受体拮抗剂 FK888 显著抑制 冷、热和乙醇刺激食管引起的 SP 释放。表明冷、热和乙醇刺激食管诱导气道 血浆渗出，与气道神经源性炎症有关，涉及 SP 释放。 3. 阻断胆碱能和肾上腺素能神经后，气道血浆渗出和 SP 释放并无显著变化。同 时证实 NANC 通路在介导冷、热和乙醇刺激食管诱导气道血浆渗出和 SP 释 放中发挥重要作用。 4. 在双侧迷走神经切断后，冷、热和乙醇刺激组气道血浆渗出和 SP 释放均被显 著抑制，提示迷走神经在冷、热和乙醇刺激食管诱导气道血浆渗出和 SP 释放 中起重要作用。 结论 冷、热和乙醇刺激食管可以诱导气道血浆渗出及 SP 释放，气道的神经源性 炎症是由 NANC 通路介导，迷走神经发挥重要作用。 第一部分 不同理化性质溶液灌注食管 对气道炎症的影响 分题一 食管灌注对气道血浆渗出的影响 目的：建立单次持续灌注食管的模型，观察不同理化性质溶液刺激豚鼠食管是否 诱导气道血浆渗出。 分组与方法： 1. 分组：根据灌注液性质，将Hartley白化豚鼠分为5组：①空白组；②对照组（37℃ NS）；③冷刺激组（4℃ NS）；④热刺激组(60℃ NS)；⑤乙醇刺激组（40％乙 醇）。根据SP受体拮抗剂FK888和神经内肽酶抑制剂Phosphoramidon(磷阿米 酮，PHOS)干预，分为4组：⑥冷刺激＋FK888拮抗剂组；⑦热刺激＋FK888 拮抗剂组；⑧热刺激＋Phosphoramidon组；⑨乙醇刺激＋FK888拮抗剂组。 2. 实验方法：豚鼠食管持续灌注不同理化性质溶液(1ml/min, 20min)，食管灌注 前注射阿托品及心得安分别阻断胆碱能及肾上腺素能神经通路，分别观察气 管、主支气管和细支气管的血浆渗出，气道血浆渗出采用伊文思蓝(Evans Blue) 法检测，并观察分别应用神经内肽酶抑制剂、SP受体拮抗剂对食管理化刺激 诱导气道血浆渗出的影响。统计学分析采用单因素方差分析(ANOVA)， SPSS17.0统计软件。 结果 1. 冷生理盐水、热生理盐水及乙醇分别刺激食管均可显著增加气管、主支气管 和细支气管的血浆渗出水平，与对照 组各部位伊文思蓝含量： [(12.52±3.86)pg/mg, (9.77±4.99)pg/mg, (11.39±3.99)pg/mg]比较；冷刺激组分别 为：[(20.00±6.38)pg/mg, (18.43±7.60)pg/mg, (20.11±7.49)pg/mg, P均0.05]；热 刺激组分别为 [(27.152±4.72)pg/mg, P0.001, (23.33±4.02)pg/mg, P0.05, (28.95±5.13)pg/mg, P0.05)]；乙醇刺激组分别为：[(21.91±5.97)pg/mg, P0.001, (19.54±4.96)pg/mg, P0.05, (20.86±5.90)pg/mg, P0.05)]。 2. 与热刺激组比较，神经内肽酶抑制剂磷阿米酮可以显著增加热生理盐水灌注 食管引起的气管、主支气管、细支气管血浆渗出，热刺激+PHOS组各部位伊 文 思 蓝 含 量 分 别 为 ： [(137.71±52.54)pg/mg, (88.48±33.22)pg/mg, (58.82±36.37)pg/mg, 气管、主支气管P均0.0