不同生长发育阶段两种途径移植骨髓间充质干细胞对大鼠乳腺发育的影响-动物营养与饲料学专业论文.docx

本研究由 “现代农业（奶牛）产业技术体系建设专项资金资助” （Supported by China Agriculture Research System） （CARS-37） “十二五”国家科技支撑项目《牧区及农牧交错带奶牛健 康养殖技术集成及产业化示范》（2012BAD12B09） 《新疆肉牛安全高效饲养关键技术研究与示范》 （2011BAD47B02） 不同用途马高效、安全养殖共性技术研发 （2012BAD45B01） 自治区重大专项《新疆农区奶牛健康养殖及疫病防控技术 推广与示范》（20101230694） 资助 I I 不同生长发育阶段两种途径移植骨髓间充质干细胞对大鼠 乳腺发育的影响 摘 要 分别采用尾静脉和乳腺基底部注射方法向不同生长发育期的大鼠体内移植 骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem ce11s ,BMSCs)，以初步探讨 BMSCs对大鼠乳腺发育影响及其作用机理。方法：选择120只SD雌性大鼠随机分 为两试验组和对照组共3组，每组40只，体重组间差异不显著(P0.05)：试验组 用50 μL生理盐水稀释的BMSCs(1×106个)以尾静脉注射移植和乳腺基底部注射 移植，对照组同样方法注射生理盐水。试验鼠第（青春期）20、60 d和（妊娠期 18 d）80 d时试验组移植BMSCs，对照组注射等量生理盐水；试验鼠第（青春期） 30、（妊娠期18d）80 d和（泌乳期15 d）100 d时每组随机取8只大鼠，屠宰前称 活重，心脏采血制备血清，检测血清中E2、P4、GH、PRL、IGF-1、EGF、TGF-α、 AR、TGF-β1、aFGF、bFGF、LEP、HGF、Glu、Alb、TP、TC、TG、ALP和LDH 水平；屠宰后取子宫、卵巢和乳腺称湿重。试验鼠分娩第4 d时每组6窝，每窝留 取8只仔鼠，即1只泌乳大鼠配8只仔鼠，进行大鼠泌乳量试验。 试验结果表明：1.大鼠不同生长发育阶段移植BMSCs后，试验鼠第80d时试 验组大鼠血清中E2、P4和IGF-1水平显著高于对照组(P0.05)，同时大鼠体重和子 宫重显著高于对照组(P0.05)，30 d和100 d时差异均不显著(P0.05)；在整个试 验期血清中GH水平和卵巢重组间差异均不显著(P0.05)。2.在不同时期移植 BMSCs后，大鼠血清中PRL、EGF、TGF-α、AR、TGF-β1、aFGF、bFGF、LEP 和HGF水平变化不同，试验鼠第80 d时大鼠血清中PRL、EGF、TGF-α和bFGF水 平显著高于对照组（P0.05），30 d和100 d时差异均不显著（P0.05）；在整个 试验过程中，大鼠血清中AR、TGF-β1、aFGF、和LEP水平差异均不显著（P0.05）。 3.试验鼠第80 d时试验组的大鼠乳腺重显著高于对照组（P0.05），30 d和100 d 时差异均不显著（P0.05）。4.试验鼠第80 d和100 d时试验组的大鼠乳腺腺泡数、 腺泡腔直径和面积显著高于对照组（P0.05），试验组的泌乳量试验鼠分娩第10 d和12 d时显著高于对照组（P0.05）。5.在不同时期移植BMSCs后，大鼠血清 II II 中Glu、Alb、TP、TC、TG、ALP和LDH水平的影响不同，试验鼠第80天时血清 中Alb、TP和ALP的水平显著高于对照组（P0.05），30 d和100 d时差异均不显 著（P0.05）；在整个试验过程中，试验组和对照组的大鼠血清中Glu、TC、TG 和LDH水平差异均不显著（P0.05）。6.整个试验过程中，乳腺基底部注射移植 组的大鼠血清中雌激素等4种激素、IGF-1等9种细胞因子和7种血液生化指标水平 均略高于尾静脉注射移植组，但差异均不显著（P0.05）。分娩第12天时乳腺基 底部注射移植组的泌乳量显著高于尾静脉注射移植组，（P0.05）。 总之，不同生长发育期的大鼠体内以尾静脉和乳腺基底部注射移植BMSCs 后，影响母鼠妊娠晚期血清中IGF-1、EGF、TGF-α、AR、TGF-β1、aFGF、bFGF、 LEP和HGF水平，而后通过内分泌和旁分泌调节作用，改变了第80天（妊娠母鼠） 时血清中Glu、Alb、TP、TC、TG、ALP和LDH水平，增加机体代谢水平，进而 促进妊娠大鼠体重、子宫和乳腺重增加，并促进乳腺组织形态发育进而增加泌乳 量。对两种途径移植BMSCs的方法来说，乳腺基底部注射移植BMSCs对乳腺发 育的促进效果比尾静脉注射移植方法较好。 关键词：骨髓间充质干细胞； 生长因子； 血液生化指标；大鼠 PAGE PAGE VI The Effects of Different Two Ways Transplantation Bone M