参附注射液对缺血再灌注肠粘膜损伤的防治作用-麻醉学专业论文.docxVIP

摘要 目的z 观察参附注射液 CShen-Fu i时ection) 对大鼠肠缺血/再灌注 C intestinal ischem泪-1叩erfusion ，IIR) 损伤的防治作用，并通过观察参附注射液对缺血而灌注 大鼠肠粘膜内核转录因手 -KB (NF-KB) 、细胞间粘附分子-1 (ICAM-1) 、肿瘤坏死 囚子-αCTNF-α) 和诱生型一氧化氮合酶 (iNOS) 表达的影响，探讨参附拉射液 防治肠粘膜损伤的机制。 方法=雄性 SD 大鼠 36 只，体重 220-270go 腹腔注射 20%氨基甲酸乙酷 19/kg 麻醉后，经腹正中线切口显露并用无创血管夹阻断/开放肠系膜上动脉，建立肠缺 血/再灌注模型。动物随机分为 3 组，每组 12 只。①缺血再灌注+生理盐水组( IR): 肠缺血前 30 分钟静脉注射生理盐水( 10ml/kg) 后，钳闭大鼠肠系膜上动脉 l 小时 后再灌注 2 小时:②参附注射液预处理组 (SF): 在肠缺血前 30 分钟静脉注射参 附注射液( 10ml/kg)j ③假手术对照组 (C): 不作动脉结扎。各组分别取肠组织， 以病理学改变作为评价肠粘膜损伤的指标:用免疫组织化学 s-P 法检测肠组织中 NF-KB 、ICAM-l 和 iNOS 的含量和分布，并用 HIPAS-2000 型计算机图象分析软件 进行图像分析，测定 NF-KB 、ICAM-l 和 iNOS 平均光密度值。用酶联免疫吸附试 验 (ELISA) 检测血浆和小肠组织中币JF-α含量。 结果: 1. 小肠组织病理形态学变化 C 组绒毛排列整齐，血管周围结构!巨常、 无明显出血，肌层纤维排列整齐，浆膜层正常，评分为 0.78土0.33; IR 织绒毛缺损、 肿胀明显，有溃殇形成，血管周罔出血明显，有中性粒细胞浸润，基底层断裂， 评分为 3.63土0.74 (与 C 组比较 PO.Ol ; 与 SF 组比较 PO.Ol); SF 组绒毛排列整 齐，局限性坏死，少量出血，中等炎性细胞浸润，讶分为 0.97土0.69 (与C 组比较 P0.05)o 2. 免疫组化检测 NF-KB 、ICAM-l 和 iNOS 蛋白表达 IR 组 NF-KB 平 均光密度值明显高于 C 组 (0.1370土0.00823 比 0.1010土0.02025; PO.Ol) ，SF 细 NF-KB 平均光密度值低于 IR 组( 0.1 192士0.01541 比 0.1370土0.00823. P0.05) ，与 C 组无明显差异( 0.1 192士0.01541 比 0.1010土0.02025; P0.05)o IR 组 ICAM-1 千 均光密度值明显高于 C 组(0.2070土0.03945 比 0.0960士0.02716; PO.Ol) ，SF 组 ICAM-l 平均光密度值明显低于 IR 组(0.1 150土0.02121 比0.2070土0.03945 j PO.Ol )， 而高于 C 组(0.1150士0.02121 比 0.0960土0.02716; P0.05)o IR 组 iNOS 平均光密 度值明显高于 C 组( 0.1783土0.02563 比 0.1054士0.01014; PO.01 )， SF 细 iNOS I 平均光密度值 明显低于 IR 组 (0.]298土0.01865 比 0.1783士0.02563; PO.O 1)，与 C 组无明显差异 (0.]298士0.01865 比 0.1054土0.01014; PO.OS) o NF-KB 标记阳性 的细胞核被染成黄色，少数胞浆也呈棕黄色 。ICAM-] 、iNOS 主要在肠粘膜细胞 的胞浆中表达。 3. 酶联免疫吸附试验检测血浆和小肠组织中补JF-α含量 IR 组血 浆和小肠组织 中 η F-α 含量( 分别为( 189.7土56.3) pg/ml 和 (]731土 162) pg/g WT) 均明显 高于 C 组(分别为( 18.6土8.4) pg/ml 和( 38.6士 10.4) pg/g WT) (PO.01) ， SF 组血浆和小肠组织中1N F-α含量(分别为 (47.5土 18.7) pg/ml 和 (683土 137) pg/g WT) 明53.低于 IR 组 (PO.Ol )，但 SF 组血浆中 TNF-α含量与 C 组无明显差 异 (PO.05 )，而SF 组小肠组织中 TNF-α含量高于 C 组 (PO.05 )。 结论z 参附注射液预处理有防止肠粘膜屏障损伤的重要作用，这种作用可能 是通过抑制肠组织中 NF-KB 的活化，减少协JF-α 、ICAM-J 和 iNOS 等介质的释放 实