不同道地产区木瓜指标成分分析及川木瓜总黄酮提取纯化工艺研究-药物化学专业论文.docxVIP

中 文 摘 要 木瓜为《中国药典》2005 年版（一部）收载品种，是蔷薇科植物贴梗海棠 Chaenomeles speciosa (Sweet) Nakai 的干燥近成熟果实。味酸、温，归肝、脾经。 具有平肝舒筋，和胃化湿的功效。传统认为安徽宣城、浙江、湖北所产木瓜为道 地药材，质量最好。川木瓜在全国产量最大，关于川木瓜质量研究的报道较少， 为了评价川木瓜药材质量，研究其与道地产地药材质量的区别，本研究对不同产 地木瓜药材指标成分进行分析，为其开发、利用提供一定的依据；木瓜含有多种 黄酮类化合物，提取川木瓜总黄酮，不仅为黄酮类物质的提取提供新的材料，也 可为川木瓜产业寻找到新的开发点，为进一步进行其药理研究奠定基础。 为此本课题以三萜酸和有机酸作为指标成分对川木瓜及其他产地的木瓜进 行了分析比较研究；同时对川木瓜总黄酮的提取、纯化工艺进行了研究主要研究。 结果如下： 一、不同产地木瓜指标成分比较分析 1.有机酸的含量比较研究 采用电位滴定法测定了不同产地木瓜中总有机酸 的含量，结果除产自广元的含量较低外，其余川木瓜总酸含量都在 6％以上，与 宣木瓜含量接近，说明川木瓜中有机酸的含量较高。 不同产地木瓜药材中苹果酸和柠檬酸含量的测定。首次建立了 RP-HPLC 法同 时测定木瓜中苹果酸和柠檬酸含量的方法。苹果酸的进样量在 0.426～2.982ug 范围内峰面积值与进样量之间线性关系良好，回归方程为 Y＝18*106X+65895，相 关系数为 r＝0.9995，平均回收率为 99.84％；柠檬酸的进样量在 0.164～1.148μg 范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系，回归方程为 Y＝918764X-59076，相 关系数为 0.9992，平均回收率为 99.71％。该方法具有良好的稳定性、重现性和 准确性，可作为检测木瓜中苹果酸和柠檬酸含量的方法。采用此法对收集样品的 含量进行测定，结果川木瓜和宣木瓜中这两种成分的含量总和都在 11mg/g 以上。 2.三萜酸的含量测定 采用 RP-HPLC 法对齐墩果酸、熊果酸含量进了测定， 结果表明不同产地样品的含量差异较大。 3.总黄酮的含量测定 采用比色法测定了不同产地药材中总黄酮的含量。以 NaNO2-AlCl3 显色，检测波长为 510nm，以芦丁为对照品，在 4.64～27.84ug/ml 范围内对照品的量与吸收度呈良好的线性关系。回归方程为 Y=1.0998X-0.0073， 相关系数为 0.9991，回收率为 97.84％。该方法具有较高的回收率，稳定性、精 密度和重复性较好。应用所建立的方法对不同产地木瓜药材中总黄酮含量进行测 定，得出目前市售不同产地木瓜中黄酮的含量有一定的差异。其中川木瓜和宣木 瓜的含量相近。 4. 对不同产地的药材进行了一般检查，结果表明药材都符合药典规定标准。 二、川木瓜总黄酮的提取纯化研究 1.优化了川木瓜总黄酮提取工艺。提取工艺为: 采用回流提取法，乙醇浓度 为 80％、固液比 1:10、提取 3 次、每次 1h。 2.研究了大孔吸附树脂纯化川木瓜总黄酮的工艺参数。选用 D140 大孔吸附 树脂，吸附条件为:药液浓度 0.1g/mL、药液 pH 值为 5、上样速度为 1BV/h；洗 脱条件为：蒸馏水、10％乙醇、50％乙醇溶液各 3BV，以 2BV/h 的流速依次洗 脱，收集 50％洗脱部位，回收乙醇，浓缩，真空减压干燥得精制木瓜总黄酮。 采用该工艺，产品纯度可达到 52.13％。 关键词 木瓜 苹果酸 柠檬酸 齐墩果酸 熊果酸 总黄酮 大孔吸附树 脂 Abstract Mugua is the dry and mature fruits of the Rose family plant chaenomeles (Sweet) Nakai,recorded in the China pharmacopoeia (2005 edition). It is a common Rheumatism Chinese medicine, which is sour in flavor, warm in nature, and attributive to the liver and spleen meridians. It is thought that the quality of mugua which from Anhui, Zhejiang, Hubei are the best. Sichuan has it largest production, but the quality research reports about Chuan mugua are very few. In order to appraise the quality