不同灌注方法取得的肝细胞脾内移植治疗急性肝损伤小鼠疗效的研究-外科学(肝胆外科)专业论文.docxVIP

重庆医 重庆医科大学硕士研究生学位论文 万方数据 万方数据 英汉缩略语名词对照 英文缩写 英文全称 中文全称 HEPES 4-(2-Hydroyethyl)-1-pipera zineeth anesulfonicacid 4-羟乙基哌嗪乙磺酸 EDTA Ethylenediaminetetraacetic acid 乙二胺四乙酸 HE HematoxylinandEosin 苏木精-伊红染色 ALT Alanineaminotransferase 谷丙转氨酶 TBiL Totalbilirubin 胆总红素 CA Carotidartery 颈动脉 CT Celiactrunk 腹腔干 CHA Commonhepaticartery 肝总动脉 HT Hepatocytetransplantation 肝细胞移植 CBD Commonbileduct 胆总管 PV Portalvein 门静脉 IVC Inferiorvenacava 下腔静脉 ALI Acute Liver Injury 急性肝损伤 HGF Hepatocyte Growth Factorreceptor 肝细胞生长因子 OLT Orthotopic Liver Transplantation 原位肝移植 HCT Hepatocellular Transplantation 肝细胞移植 HF Hepatic Failure 肝衰竭 1 不同灌注方法肝细胞脾内移植治疗急性肝损伤小鼠疗 效研究 摘 要 目的：探讨经门静脉、下腔静脉灌注对提取小鼠肝细胞产率、纯 度、存活率的影响，并比较两种灌注方法所得肝细胞脾内移植治疗急 性肝损伤（Acute Liver Injury， ALI）小鼠的疗效。 方法：采用两步法分别经门静脉与下腔静脉灌注分离小鼠肝细胞， 30 只小鼠切除部分肝脏建立 ALI 模型，随机分为 A、B、C 三组，每 组 10 只，分别脾内注射经门静脉灌注获得的肝细胞悬液 0.5ml、经下 腔静脉灌注获得的肝细胞悬液 0.5ml 及对照组 Hank’s 液 0.5ml，移植 后第 10 天观察各组小鼠肝功能、脾内肝细胞分布及脾内白蛋白合成变 化情况。 结果：门静脉途径灌注法所得肝细胞的产率、纯度、存活率优于 下腔静脉途径灌注分离的肝细胞（p0.05）。移植第 10 天，与对照组比 较，A、B 两组都能明显改善 ALI 小鼠的肝功能（p0.05），脾脏 HE 染色肝细胞散在分布，脾脏共聚焦白蛋白免疫荧光染色有大量绿色荧 光信号，A 组强于 B 组。 2 结论：门静脉途径灌注法所得肝细胞的产率、纯度、存活率优于 下腔静脉途径灌注分离的肝细胞；门静脉灌注所得肝细胞脾移植治疗 ALI 疗效优于下腔静脉灌注。 关键词：门静脉; 下腔静脉；肝细胞脾内移植；急性肝损伤 3 STUDY OF HEPATOCYTE TRANSPLANTATION BY DIFFERENT PERFUSION METHODS IN THE TREATMENT OF ACUTE HEPATIC INJURY IN MICE ABSTRACT Objective: To investigate the portal vein, inferior vena cava perfusion on the extract mouse liver cells, survival rate and purity ;and comparison of two kinds of perfusion methods’rat hepatocyte intrasplenic transplantation in the treatment of liver injury ( Acute Liver Injury ALI )mouse. Method:isolated mouse liver cells By two step respectively via the portal vein and inferior vena cava,36 mice liver segment resection to establish the model of ALI, A, B, C three group,respectively the intrasplenic injection via portal vein perfusion for hepatic cell suspension 0.5ml, via the inferior vena cava perfusion for hepatic cell suspension, Hank s0.5ml 0.5ml,Observation on different