组织工程骨bcbbbmpbfgf在兔体内异位成骨的实验研究-experimental study on ectopic osteogenesis of tissue engineering bone bcbbbmpbfgf in rabbits.docxVIP

贵阳医学院 贵阳医学院 2011 届硕士论文 PAGE PAGE 10 组织工程骨 BCBB/BMP/bFGF 在兔体内异位成骨的实验研究 专 业：外科学 姓 名：陈 勇 导 师：邓 进 摘要 目的：探讨附有骨形态发生蛋白（Bone Morphogenetic Protein，BMP）及碱性 成纤维生长因子 (basic Fibroblast Growth Factor，bFGF)的双相陶瓷生物骨 （Biphasic Ceramic Biologic Bone，BCBB）植入兔股部肌袋内的异位成骨能力。 方法：成年健康新西兰大白兔 48 只，雌雄不限，随机数字表法分成 A、B、C3 组，每组 16 只。将三种不同的组织工程骨分别植入 3 组兔右侧股部肌袋中，其 中 A 组植入 BCBB/BMP/bFGF；B 组植入 BCBB/BMP；C 组为植入 BCBB，术后第 2、4、 8、12 周取植入标本观察新骨的生成情况，通过大体形态学、X 线、组织学及计 算机图像分析等观察指标，比较 A、B、C 三组各组间的成骨能力的大小。 结果：术后 2、4、8、12 周摄片 A、B、C 组组织工程骨密度改变不明显，其中 A 组在术后 12 周摄片可见组织工程骨周围密度稍增高。术后第 2 周，A、B、C 三 组组织工程骨 HE 染色及 Masson 三色染色未见新骨形成；术后第 4、8、12 周对 A、B、C 组进行取材，通过 HE 染色及 Masson 三色染色，计算机图像分析观察后 得出三组各时间点新成骨面积百分比如下（单位：%）：术后第 4 周时，A 组为 7.51±0.92，B 组为 4.53±0.95，C 组为 1.67±0.78；术后第 8 周，A 组为 13.43 ±1.03，B 组为 8.57±0.93，C 组为 3.40±0.87；术后第 12 周时，A 组为 34.07 ±2.57，B 组为 22.45±1.42，C 组为 5.98±1.20；在 4,8,12 周时，A 组新骨形 成面积大于 B 组和 C 组，B 组新骨形成面积大于 C 组，且差异具有显著性（P＜ 0.01）。 结论：附有 BMP 和 bFGF 的 BCBB 具有异位成骨能力，其成骨能力优于 BCBB/BMP、 BCBB，可以作为一种比较理想的骨组织工程材料。 关键词:组织工程骨；双相陶瓷生物骨；骨形态发生蛋白；碱性成纤维细胞生长 因子；异位成骨能力 1．前言 随着科学技术的提高和社会生产力的飞速发展，由于外伤以及炎症和肿瘤等 各种原因所致的骨缺损与骨不连已成为威胁人类健康的严重问题之一。目前主要 的骨缺损修复材料包括自体骨和异体骨，虽然自体骨对于骨缺损的修复作用明 显，但是来源有限， 并且增加了患者的痛苦。异种骨不存在供体缺乏的问题， 但是其具有抗原性，常常会因为剧烈的免疫排斥反应导致植入物的失败，而且还 存在感染疾病的风险[1]。广泛的使用各种骨替代物，但是在某些方面总是不尽如 人意。因此，这就使骨创伤医生对骨缺损的治疗产生了革新的愿望[2，3]。20 世纪 80 年代，随着“组织工程学（Tissue Engineering）”这一概念的提出，以及分子 生物学、移植免疫学、细胞生物学、医学材料学以及基因技术、分子克隆技术、 体外组织构件技术等的迅速发展，其分支科学（比如软组织组织工程学、骨组织 工程学等）就慢慢兴起。骨组织工程学的建立和迅速发展为骨缺损的修复带来了 新的希望[4]。而骨组织工程的研究主要集中在支架材料、种子细胞、生长因子和 组织器官的构建等方面[5]。 理想的支架材料应具有良好的生物组织相容性、骨传导性和骨诱导性、良好 的生物降解性、可塑性和一定机械强度、理想的孔隙率和适合骨周围组织生长的 表面微环境。良好的生物相容性是指骨组织支架材料作为人工细胞外基质材料， 是细胞生长和繁殖的场所，因此无论是支架材料本身还是其降解产物都要对受体 阻滞细胞无毒性、无致畸性、不引起局部炎症反应。理想的骨支架材料必须具有 良好的骨传导性和骨诱导性。传导性是指生物材料植入受体内后，宿主细胞组织 能沿着支架生长，同时支架材料逐渐降解，在原支架材料区域形成新生骨组织； 骨诱导性在职支架材料能携带并缓慢释放生长因子，诱导间充质细胞向成骨细胞 分化，形成骨组织。骨组织工程主要就是基于这两个原理来成骨的[6]。良好的生 物降解性是在材料完成支架作用后能够降解，降解率应与骨组织生长率相适应, 降解时间能根据组织生长特性来进行调控，并且不影响新生成组织的结构和功 能。支架材料应具有良好的可塑性，可以预先制作成古河组织工程骨要求的形状 和尺寸，并具有一定的机械强度，能为新生骨组织提供支撑，以提供和维持一定 时间直至新生组织具有自身生物力学特性[7]。支架材料具有理想的