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替罗非班早期干预对非ST抬高型急性冠脉综合征患者MMP9与sCD40L表达影响 　　摘要：目的 观察替罗非班早期干预治疗对非ST抬高型急性冠脉综合征患者基质金属蛋白酶9（MMP9）与可溶性CD40配体（sCD40L）的影响。方法 120例非ST抬高型急性冠脉综合征患者（发病48 h）随机分为常规治疗组和替罗非班组，收集血液检查结果， 抽血分离单核细胞， 逆转录聚合酶链式反应法检测患者MMP9和sCD40L水平的变化。结果 替罗非班可下调MMP9、CD40和CD40L mRNA的表达，有时间依赖性，应用12 h、24 h、36 h后，替罗非班组与常规治疗组相比，MMP9和sCD40L水平分别下降50%、73%和82%；sCD40L的表达降低32%、69%和88%。结论 替罗非班能抑制sCD40L以及MMP9的表达，替罗非班对MMP9的抑制作用与CD40/CD40L信号通路相关。 　　关键词：替罗非班；可溶性CD40配体；基质金属蛋白酶9；逆转录聚合酶链式反应；非ST抬高型急性冠脉综合征 　　中图分类号：R541.4 R256.2 文献标识码：B 文章编号：1672 　　动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）是危害人类健康的常见心血管疾病，是引起死亡的主要原因之一，目前认为AS是一种炎症性疾病，其发生、发展的各个阶段符合慢性炎症的表现[1]。近年来CD40和CD40配体（CD40ligand，CD40L）在AS发生和斑块稳定性中的作用日益引起人们的重视。急性冠脉综合征（acute coronary syndrome，ACS）有共同的病理生理，即冠状动脉粥样斑块破裂，形成血栓，使冠状动脉血管部分或完全闭塞，导致心肌缺血或梗死。而血小板的活化、黏附和聚集是动脉血栓形成过程中的关键步骤。激活的血小板释放的可溶性CD40配体（sCD40L）对研究ACS的发生、发展具有重要价值[2]。基质金属蛋白酶（MMPs）是一种依赖Zn2+和Ca2+的酶家族， 能特异性地与细胞外基质各成分相结合，并降解胞外基质。MMPs的活性与斑块不稳定性密切相关，其中以基质金属蛋白酶9（MMP9）关系最为密切[3，4]。 　　本研究选择非ST抬高型急性冠脉综合征患者，采用替罗非班干预，观察对MMP9、可溶性CD40配体（sCD40L）的影响，进一步探讨替罗非班对斑块稳定性和抑制免疫炎症的可能机制。 　　1 资料与方法 　　1.1 研究对象 收集2011年1月—2011年5月本院心内科ACS患者120例，其中男60例，女60例，年龄42岁～75岁。全部病例达到不稳定型心绞痛或非ST段抬高型急性心肌梗死诊断标准，并且TIMI评分在3分以上为入选标准。排除各种急慢性感染性疾病、糖尿病酮症、肾脏、肝脏疾患、Graves病、肺间质纤维化、结缔组织病及肿瘤、外周血管病和脑血管病。将上述患者随机分为常规治疗组与替罗非班组，年龄分别为（55.1±8.9）岁、（52.5 ±9.8）岁，差异无统计学意义。 　　1.2 方法 　　1.2.1 治疗方法 全部病例行常规治疗，包括抗血小板、抗凝、扩冠治疗；常规治疗未应用替罗非班，替罗非班组加用替罗非班（欣维宁，武汉远大制药），用量根据体重计算，起始推注剂量为10 μg/kg，在3 min内推注完毕，而后以0.15 μg/（kg·min）的速率维持滴注，维持量滴注持续36 h。 　　1.2.2 检测方法 常规治疗组次日清晨抽血，应用替罗非班组12 h、24 h、36 h分别抽取患者血液标本3 mL，立即注入预先加有无菌3.8%枸橼酸钠0.2 mL的抗凝管中备用。分离血单一核细胞： 按文献[5]进行。按Trizol试剂盒说明书提取总RNA，将RNA在-70 ℃保存待测[6]。然后进行逆转录聚合酶链反应，紫外凝胶图像分析仪进行数据分析，以目的基因mRNA扩增后产物的光密度值与内参照GAPDHmRNA扩增后产物光密度值的比值作为mRNA表达的相对值。sCD40L、MMP1.3 统计学处理 所有数据以均数±标准差（x±s）表示，采用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析，多重比较采用SNK法，P0.05为有统计学意义。 　　2 结 果 　　替罗非班同时抑制MMP9与sCD40L的表达，其作用亦呈时间依赖性。与常规治疗相比，应用替罗非班后12 h、24 h、36 h MMP9的表达降低50%、73%和82%；sCD40L的表达降低32%、69%和88%，差异有统计学意义（P0.05）。详见表2。 　　3 讨 论 　　动脉粥样硬化的本质是慢性炎症过程， 单核/巨噬细胞是AS斑块形成中最重要的细胞之一。CD40受体与CD40配体（CD40L） 是一对互补跨膜蛋白， 分别属于肿瘤坏死因子受体（TNFR）和TNFR超家族成员， 几乎可在人A