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模拟酸雨和富营养化复合胁迫对水葫芦抗氧化酶影响 　　摘要：以水葫芦为研究对象，利用水培法，探讨了模拟酸雨和富营养化复合胁迫对水葫芦叶片抗氧化酶的影响。结果表明，随着酸雨pH值的下降和富营养化水平的提高，水葫芦叶片的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性总体均呈下降趋势，而过氧化物酶（POD）活性呈上升趋势，并且3种酶活性的变化幅度越来越大。表明随着pH值的下降，酸雨对SOD、CAT活性均产生抑制作用，而对POD活性产生促进作用，并且会随着富营养化水平的提高作用增强。并对3种酶活性变化进行相关性分析，发现三者相关系数较大，说明3种酶之间有一定的协调作用。 　　关键词：模拟酸雨；富营养化；复合胁迫；水葫芦；抗氧化酶 　　中图分类号： Q945.78文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）11-0430-03 　　收稿日期：2015-05-11 　　基金项目：江苏省高校自然科学研究重大项目（编号：12KJA180003）；江苏省高校生物学优势学科建设工程（编号：2014-PAPD）。 　　作者简介：和华龙（1989―），男，河南周口人，硕士研究生，主要从事植物生理学研究。E-mail：hualonghe@。 　　通信作者：薛建辉，教授，博士生导师，主要从事森林生态学研究。Tel：（025E-mail：jhxue@。中国是继欧美之后世界上出现的第三大酸雨区，酸雨面积约占国土面积的40%[1]，而富营养化湖泊的比例更是高达60%[2]。酸雨和富营养化的危害日益严重，对我国的生态环境、经济发展和居民健康造成了巨大威胁[3]。研究酸雨和富营养化复合胁迫对水生植物的影响，探索水生植物在富营养化条件下对酸雨的响应机制，从而选择合适的水生植物用于水环境修复，具有十分重要的意义。在逆境条件下，植物体内活性氧代谢失调，自由基大量积累，可导致膜系统损伤，进一步造成细胞的代谢功能丧失和死亡[4-5]。植物体内存在一整套的抗氧化系统，它能使活性氧的产生和清除处于一种动态平衡的状态，从而维持植物的正常生长[6-7]。其中，抗氧化酶发挥着重要作用，包括超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和过氧化物酶（POD）[8-9]。目前，国内外关于酸雨对植物影响的研究较多，但是酸雨和富营养化复合胁迫对植物抗氧化酶系统的影响则鲜见报道[10]。本研究以水葫芦为对象，利用水培法，探讨了在富营养化条件下酸雨对水葫芦叶片抗氧化酶系统的影响，以期为富营养化水体的生态修复以及适宜水生植物的选择提供理论依据。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　水葫芦，学名凤眼蓝（Eichhornia crassipes），原产于南美洲亚马逊河流域，雨久花科凤眼蓝属，是一种漂浮性水生植物。水葫芦根系发达呈须状，叶柄膨大而中空，叶子直立而光滑，花为蓝色喇叭状。水葫芦适应性强，是净化水质的良好植物，但其繁殖迅速，难以根除，会导致生态环境恶化[11]。试验在南京林业大学下蜀林场温室内进行，选取生长健康并且一致的水葫芦幼苗置于塑料周转箱（长50 cm、宽38 cm、 高30 cm） ，箱内盛30 L营养液。 　　1.2方法 　　1.2.1营养液营养水平设置营养液采用Hoagland改良配方，以处理过的高纯水配制。水培1个月后，选取生长健康并且一致的水葫芦分为3组，再分别用不同营养水平的营养液培养。营养液设置低富营养化（N1）、中富营养化（N2）、高富营养化（N3）3个水平，其中铁盐和微量元素的配方与Hoagland营养液一致。各营养液的成分和含量见表1。 　　1.2.2模拟酸雨处理水平设置酸雨母液采用1 mol/L硫酸与2 mol/L硝酸等体积混合而成，以处理过的高纯水配制。模拟酸雨设置3个水平，分别为pH值7.0、4.0、2.0。模拟酸雨处理采用喷雾法，用喷雾器向水葫芦叶片喷洒酸雨。在叶面喷洒酸雨量为20 mm（相当于中雨），喷洒时间为30 min。喷洒酸雨时须缓慢，以叶片不滴液为标准，同时为防止污染营养液，喷后更换营养液。每组水葫芦样品喷洒模拟酸雨3次，隔1 d喷1次，处理完成后的第2天，随机选取新鲜叶片进行生理指标测定。 　　1.2.3生理指标测定参考李合生的方法[12]，分别测定水葫芦叶片的SOD、CAT、POD活性。SOD活性以抑制氮蓝四唑（NBT）光化还原50%为1个酶活性单位（U/g），CAT活性以D240 nm每分钟减少0.1为1个酶活性单位[U/（g?min）]，POD活性以D470 nm每分钟增加0.01为1个酶活性单位 [U/（g?min）]。每组水葫芦样品测定3个重复，每个重复均取自不同的样品。 　　1.3数据分析 　　利用Excel和SPSS软件进行数据处理和分析。 　　2结果与分析