混合盐胁迫对水飞蓟种子萌发期耐盐性及水飞蓟宾含量影响.docVIP

混合盐胁迫对水飞蓟种子萌发期耐盐性及水飞蓟宾含量影响 　　摘要：以水飞蓟为试验材料，采用浓度为0.1、0.2、0.3 mol/L的混合盐（NaCl、Na2CO3、NaHCO3、Na2SO4等物质量混合）溶液分别对水飞蓟种子进行处理，计算发芽率、发芽势和相对盐害率；选择大田中长势相近的水飞蓟植株进行不同浓度混合盐溶液的胁迫处理，测定水飞蓟素和水飞蓟宾的含量。结果显示，相对盐害率随着处理混合盐溶液浓度的增大而增加，0.1 mol/L混合盐溶液处理下，种子相对盐害率为0；发芽率、发芽势在0.1 mol/L混合盐溶液处理下最高，且高于对照组；水飞蓟素和水飞蓟宾的含量均随着混合盐溶液浓度的增高呈现出先增高后降低的趋势，以 0.2 mol/L 混合盐溶液的促进作用最好。 　　关键词：混合盐；胁迫；水飞蓟；耐盐性；相对盐害率；水飞蓟素；水飞蓟宾 　　中图分类号： S567.01 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2017）20-0144-03 　　中药水飞蓟为菊科（Asteracea）水飞蓟属植物水飞蓟[Silybum marianum （L.） Gaertn]的干燥成熟果实，是一味常用的清热解毒、疏肝利胆的药物[1]。其主要成分是水飞蓟素，具有抗自由基活性、抗脂质过氧化作用、抗脂氧酶等作用[2]。水飞蓟素中以水飞蓟宾为主，还含有异水飞蓟宾和水飞蓟宁[3]。 　　季平等研究在不同类型盐碱胁迫下，耐盐碱大豆品种的各器官生物量、荚数、粒数、产量和生长性状均显著高于盐碱敏感品种[4]。随着全球工业化的发展，环境污染的加剧，二氧化碳排放量的增加，逐渐形成温室效应，造成全球?馕律?高，海平面不断上升，由此引起土壤盐渍化现象日趋严重[5]。当前全世界有 9.55 亿hm2盐碱地，我国约有2 600万hm2盐碱地，其中约660万hm2盐碱耕地。因此，开发利用盐碱地，提高盐碱地的利用率，具有十分重要的意义。本试验主要研究不同浓度混合盐溶液对水飞蓟种子发芽率、发芽势、相对盐害率、水飞蓟素和水飞蓟宾含量的影响，选出适宜浓度的混合盐溶液，以期为探究水飞蓟栽培新技术提供一定的理论参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　试验所用水飞蓟种子购自安徽亳州明雨中药材销售有限公司，种于吉林农业科技学院中药学院九站药用植物园。 　　1.2 萌发期耐盐性比较 　　选取大小相同、饱满的水飞蓟种子，用1% NaClO溶液浸泡15 min后，无菌水反复冲洗，用0.1、0.2、0.3 mol/L混合盐（NaCl、Na2CO3、NaHCO3、Na2SO4等物质量混合）溶液分别浸泡种子4 h，再将种子均匀地置于铺有2层滤纸、直径为10 cm的培养皿中，各加入8 mL相应的混合盐处理溶液，温度设定为25 ℃，放在光照培养箱中进行培养，每个处理50粒种子，重复3次，为了保证混合盐溶液的浓度，每隔2 d换1次处理液及滤纸。每天记录发芽种子数，以胚根突破种皮记为种子萌发，计算发芽率、发芽势和相对盐害率[6]。计算公式如下： 　　发芽率=（9 d累积发芽的种子数/供检测的种子总数）×100%； 　　发芽势=（4 d累积发芽的种子数/供检测的种子总数）×100%； 　　相对盐害率=（对照发芽率-处理发芽率）/对照发芽率×100%。 　　当处理发芽率大于对照发芽率时相对盐害率记为0，视为无盐害。 　　1.3 混合盐胁迫水飞蓟植株 　　选择大田中长势相近、生长旺盛、无病虫害的水飞蓟植株进行混合盐胁迫处理。试验采用单因素随机区组设计，设置对照组（CK）和处理组。混合盐处理组设0.1、0.2、0.3 mol/L等3个浓度水平，每个处理3次重复，每个处理浇灌量为 300 mL，对照组浇灌等量自来水。每10 d浇灌1次，连续浇灌3次。 　　1.4 测定项目及方法 　　1.4.1 水飞蓟素含量的测定 称取2 mg水飞蓟宾标准品，用80%乙醇溶液溶解并定容到10 mL容量瓶中，配成水飞蓟宾对照品母液，分别吸取水飞蓟宾对照品母液0、0.5、1.0、2.0、3.0 mL，将母液稀释成不同浓度，用80%乙醇溶液定容至10 mL，于紫外分光光度计上测定288 nm处的吸光度（D288 nm），根据测定的结果，以水飞蓟宾对照品母液的浓度为x轴，D288 nm为y轴，得到线性相关方程为y=0.790 7x+0.000 1，r2=0.999 5，并绘制标准曲线。 　　取2 g水飞蓟种子粉于提取烧瓶中，置于超声波水箱中，每次用12 mL乙酸乙酯溶液在50 ℃下浸提4 h，共计2次，将浸提液合并，经旋转蒸发回收乙酸乙酯，经过真空干燥得到黄色粉末状提取物，称取2 mg水飞蓟提取物，然后加入80%乙醇溶液，用超声波辅助溶解，过滤，定容至10 mL，即为提取物母液，于紫外分