脑血管畸形患者VEGF表达及临床意义.docVIP

脑血管畸形患者VEGF表达及临床意义 　　[摘要] 目的 观察脑血管畸形(CVM)患者血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达情况,探讨VEGF蛋白在脑血管畸形患者中的表达特点与意义。方法 应用免疫组织化学方法检测62例脑血管畸形患者标本中VEGF蛋白的表达。结果 62例脑血管畸形标本中,VEGF蛋白在畸形血管中阳性表达率为72.6%(45/62),畸形血管周围正常脑组织中血管的VEGF蛋白阳性表达率为51.6%(32/62),两者比较有差异(P0.05)。结论 VEGF参与CVM的发生发展。 　　[关键词] 血管内皮生长因子; 脑血管畸形; 免疫组化 　　[中图分类号] R743.4 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2010)11-156-02 　　 　　The Expression of VEGF in Cerebral Vascular Malformation and Its Significance 　　YANG Yanli1 WEI Maofu2 LIU Jingwen2 　　1.Department of Medicine;2.Department of Pathology,Humen Hospital,Dongguan 523900,China 　　 　　[Abstract] ObjectiveTo investigate the expression of VEGF in Cerebral Vascular Malformation(CVM)and find out its significance. MethodsThe expression of VEGF were assessed by immunohistochemistry staining. ResultsIn 62 cease of CVM positive expression rates of VEGF was 72.6%(45/65)and 51.6%(32/62)in normal brain tissues. The positive rate was higher in CVM than in normal brain tissues(P0.05). ConclusionVEGF might take part in the pathogenesis of cerebral CVM development and growth. 　　[Key words]VEGF; CVM; Immunohistochemistry 　　 　　近年来研究发现,血管内皮生长因子(VEGF)在血管的发生、发展、血管结构的稳定及增生、退变中起着非常重要的作用[1]。我们采用免疫组织化学方法对62例脑血管畸形患者组织中VEGF表达的情况进行研究,探讨VEGF在脑血管畸形中的表达特点及意义。 　　1 材料与方法 　　1.1 标本来源 　　收集东莞市虎门医院及东莞市厚街医院1995年1月～2010年2月期间进行手术的脑血管畸形患者62例,男28例,女34例,年龄19～35岁,平均25.4岁。术后均经病理证实。 　　1.2 试剂及免疫组化染色方法 　　鼠抗人VEGF单克隆抗体、抗体稀释液及试剂盒均购自基因公司。其稀释度为1∶50。所有标本均用10%中性福尔马林固定,石蜡包埋,4μm连续切片,按二步法进行免疫组化染色,染色前标本切片进行抗原修复处理,一抗在室温孵育1h,二抗在室温下孵育0.5h,DAB显色,苏木素复染。用已知阳性的对照片作VEGF抗体的阳性对照,用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照。 　　1.3 判断标准 　　所有免疫组化片子用奥林帕斯BX50显微镜进行定性和半定量评估。请三个高职称病理医生在不知道临床信息的情况下独立地对所有免疫组化片子进行评估。阳性判断标准为胞质和(或)胞膜出现了黄色或棕黄色颗粒状,并用阳性片作为对照。每张切片随机选择10个视野,40×10高倍显微镜下观察计数。参照文献[2]方法根据染色的强度及阳性细胞的数量分别计分。A:染色强度:不着色为0分,淡黄色为1分,黄色为2分,棕黄色为3分。B:阳性细胞所占百分率:75%为4分。根据染色强度与阳性细胞数得分之积分为4级,即(-)为0分,弱阳性(+)为1～2分,阳性(++)为3～4分,强阳性(+++)为5～6分。将A×B作为其染色的计数,只有A×B 3 分才算免疫反应阳性,并按乘积分数将染色结果分为4 个等级:-(0～2 分)、+(3～5 分)、+ +(6～8分)和+ + +(9～12分)。 　　1.4 统计学方法 　　统计学处理应用SPSS10.0软件进行χ2检验和Fisher确切概率法,P0.05差异有统计学意义。