吡格列酮对糖尿病大鼠视网膜早期病变的影响及其机制研究-眼科学专业论文.docxVIP

贵阳医学院 贵阳医学院 2013 届硕士研究生论文 PAGE PAGE 10 吡格列酮对糖尿病大鼠视网膜早期病变的影响及其机制研究 专业：眼科学 研究生：徐涛 导师：王鲜 教授 摘要： 目的 观 察 吡 格 列 酮 对 早 期 糖 尿 病 大 鼠 视 网 膜 丝 氨 酸 / 苏 氨 酸 激 酶 （serine/threonine kinase，Akt）的表达及微血管病变的影响。 方法 雄性 SD 大鼠 58 只，取 18 只作为空白对照组，其余采用链脲佐菌素（STZ）诱导大鼠 糖尿病模型。去除未成模及死亡的大鼠 4 只，将成模大鼠随机分为 2 组：对照组 （9 只×2）及实验组（9 只×2）。所有大鼠每周监测血糖及体重。实验组在建模 后第 3 天开始给予吡格列酮灌胃（10mg/kg，隔日一次），空白对照组和实验组大 鼠则在同时间给予等量的生理盐水灌胃。给药后 4 周、8 周末进行大鼠视网膜铺 片观察、免疫组织化学法检测 p- Akt（Ser473）、p- Akt（Thr308）及总 Akt 蛋 白的阳性单位及分布。结果 免疫组织化学结果显示，糖尿病组视网膜中的 Akt、 p- Akt（Ser473）及 p- Akt（Thr308）较空白对照组呈微弱表达，阳性单位值 较空白对照组差异有统计学意义（P0.05），实验组 Akt、p- Akt（Ser473）及 p- Akt（Thr308）阳性反应表达较对照组增强，阳性单位值较对照组差异有统计 学意义（P0.05）；ADP 酶组织化学显示：4 周时各组间视网膜血管无明显变化， 均未见明显周边部毛细血管扭结、迂曲或形成血管闭塞及血管袢现象。但 8 周时， 对照组和实验组均可看见视网膜周边部毛细血管有扭结、迂曲，并且观察到实验 组该现象较对照组减轻。 结论 吡格列酮能明显激活实验性糖尿病大鼠 Akt 蛋白 及其磷酸化位点，从而缓解早期糖尿病大鼠的视网膜病变。 关键词： 糖尿病视网膜病变； Akt； p-Akt； 吡格列酮； 缩略词表 英文缩写 Akt 英文全称 Serine/threonine kinase 中文全称 丝氨酸/苏氨酸激酶 DR eNOS Diabete retinopathy endothelial nitric oxide synthase 糖尿病视网膜病变 内皮型一氧化氮合酶 PI3K Phosphatidylinositol 3-kinase 磷脂酰肌醇 3-激酶 PKB Protein Kinase B 蛋白激酶 PPAR-γ peroxisome proliferator-activated 过氧化物酶增殖物激活 receptor-γ 受体γ ROS reactive oxygen species 活性氧簇 Ser 473 Serine 473 丝氨酸 473 位点 STZ Streptozotocin 链脲佐菌素 Thr308 Threonine308 苏氨酸 308 位点 VCAM - 1 vascular adhesion molecule 血管黏附分子- 1 前 言 糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy,DR）作为糖尿病的眼部并发症 已严重影响人类的健康。在 1 型和 2 型糖尿病患者中 DR 的发生率为 24％～70％。 在欧美等发达国家，DR 已成为第一或第二位的致盲原因[1,2]。在我国，2007 年 5 月至 10 月横断面调查北京顺义地区≥40 岁居民 4549 例，该人群中糖尿病视网 膜病变的患病率为 29．2％，与北京地区 1992-1995 年何守志[3] ，王光璐[4]等人 的调查结果相比，其患病率明显升高。并且 BES 调查显示 DR 是随着糖尿病病程 年限的增加而进行性发展的[5]。相关研究表明糖尿病血管病变的一个主要原因是 血管内皮细胞的功能存在异常[6]，内皮细胞的数目及其功能在糖尿病血管并发症 的产生和进展中起至关重要的作用。但糖尿病血管并发症的机制复杂，目前还没 有完全明确。 彩色多普勒检查显示，在糖尿病早期视网膜中央动脉已有血流速度降低表现 [7，8]。视网膜血流动力学异常在糖尿病视网膜病变前期已经存在，并可能促使 DR 的形成[7]。一氧化氮(nitric oxide，NO) 是重要的血管活性物质，在眼部血流 的调控机制中发挥着重要作用[9]。一氧化氮合酶(nitric oxide synthase，NOS) 在视网膜的不同部位均有活性分布。其上游的 PKB/Ak protein kinase B/serine threonine kinase）调控严密精确,其调控紊乱可引起多种疾病如糖尿病和癌症 等。Akt 的活化主要有两种调控方式：其一是依赖 PI3K （Phosphatidylin