阿司匹林对人结肠癌细胞中肿瘤干细胞标记物CD44表达影响.docVIP

阿司匹林对人结肠癌细胞中肿瘤干细胞标记物CD44表达影响 　　【摘要】 目的：观察阿司匹林对人结肠癌肿瘤干细胞标志物CD44的影响，以探讨其对结肠癌干细胞的作用。方法：Western blot检测不同浓度阿司匹林作用后CD44在人结肠癌细胞株HT-29和SW480中的表达情况。结果：Western blot结果显示肿瘤干细胞标志物CD44在人结肠癌细胞株HT-29和SW480中均有表达，阿司匹林能降低HT-29和SW480中CD44蛋白的表达，并具有良好的量-效关系（P0.05）。结论：阿司匹林能降低结肠癌细胞株HT-29和SW480中CD44的表达，并对结肠癌肿瘤干细胞有抑制作用。 　　【关键词】 阿司匹林； 结直肠癌； 肿瘤干细胞标志物； CD44； HT-29； SW480 　　【Abstract】 Objective：To investigate the effect of Aspirin on the expression of cancer stem cell marker CD44 in human colon cancer.Method：Western blot was used to detect the expression of CD44 in human colon cancer cell line HT-29 and SW480 after different concentrations of Aspirin.Result：Western blot showed that cancer stem cell marker CD44 expression in both HT-29 and SW480 human colon cancer cell lines，Aspirin could reduce the expression of CD44 HT-29 and SW480，it had a good dose-response relationship（P0.05）.Conclusion：Aspirin can reduce the expression of CD44 in colon cancer cell line HT-29 and SW480，inhibit the proliferation of colon cancer stem cells. 　　【Key words】 Aspirin； Colorectal cancer； Cancer stem cell marker； CD44； HT-29； SW480 　　First-author’s address：The Affiliated Hospital of Zunyi Medical College，Zunyi 563099，China 　　doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2017.01.001 　　结直肠癌是全球第三大最常见的恶性肿瘤，也是导致癌症死亡的主要原因[1]。肿瘤干细胞虽然只占结直肠癌组织一小部分，但其具有自我更新的能力，并在肿瘤的发生、生长和转移中起重要作用，因而是肿瘤根治的靶点。CD44是Wnt通路的靶基因[2]，CD44在结直肠癌中高表达，可作为结直肠癌干细胞标志物[3-4]，与结直肠癌的发生、发展以及浸润转移密切相关，可能成为一个潜在的治疗靶点。非甾体抗炎药（NSAIDs）阿司匹林因具有解热镇痛抗炎作用，在临床十分常用，且研究显示可以通过降低腺瘤和结直肠癌发生的风险，从而有效预防结直肠癌发生[5]，抑制甚至逆转结直肠癌癌前病变，延长患者的寿命[6]。本研究小组前期实验结果表明阿司匹林可显著降低HT-29（COX-2高表达）、SW-480（COX-2阴性表达）细胞系中的肿瘤标志物CD133、Lgr5的表达[7-8]。阿司匹林对肿瘤干细胞标志物CD44有何影响，目前尚不清楚。本实验拟通过研究阿司匹林对人结肠癌细胞株HT-29和SW-480中肿瘤干细胞标记物CD44表达影响，进一步探讨阿司匹林预防结直肠癌发生的可能机制，现报道如下。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 细胞株HT-29和SW-480人结肠癌细胞株。 　　1.2 主要试剂 McCoy’S 5a培养基、胰蛋白酶及阿司匹林（美国Sigma公司），BCA蛋白浓度测定试剂盒及RIPA裂解液（武汉博士德公司），辣根酶标记山羊抗小鼠IgG及小鼠抗人β-actin（北京中杉金桥公司），小鼠抗人CD44单克隆抗体（美国Cell Signaling Technology公司）。 　　1.3 方法 　　1.3.1 细胞的培养 用10%胎牛血清的McCoy’S 5a培养基培养HT-29、SW480细胞株，置于37