从基因表达差异分析腧穴与非腧穴针刺效应差异.docVIP

从基因表达差异分析腧穴与非腧穴针刺效应差异 　　[摘 要]目的：从基因转录水平分析针刺腧穴和非腧穴效应的差异。方法：选取健康、雄性7月龄快速老化模型鼠(SenescenceAcceleratedMouse，SAM-P/10)。随机分为非针刺组、穴位针刺组和非穴位针刺组，每组20只，采用DDRT-PCR技术，展示三组脑基因表达谱的变化情况。结果：针刺腧穴可引起某些基因表达的增强，而非穴则没有明显的变化，同时观察到针刺非穴可以引起一定的应激反应。结论：腧穴具有一定的特异性，临床上应准确取穴以增强疗效。 　　[主题词]穴位特异性；基因表达；针刺感应 　　AnalysisonDifferenceofAcupunctureEffectsBetweenAcupointandNon-AcupointfromDiffe renceofGeneExpression 　　YuJianchun，YuTao，HanJingxian(DepartmentofGerontology， theFirstAffiliatedHospital，TianjinCollegeofTCM，Tianjin300193，China) 　　[Abstract]PurposeToanalyzedifferenceofacupunctureeffectsbetweenacupointandnon-a cupointingenetictran-scriptionlevel.Methods Healthy， malesenescenceacceleratedmice，SAM-P/10，aged7months， weredividedrandom-lyintonon-acupuncturegroup， acupointacupuncturegroupandnon-acupointacupuncturegroup，20miceineachgroup， andDDRT-PCRtechniquewasatoptedtodisplaygeneexpressionspectrumofthebrain.Results Acupunctureatacu-pointsstrengthenedexpressionofsomegenes，acupunctureatnon-acupointsdidnotchangetheexpression，andacupunc-tureatnon-acupointscouldinduceacertainstressreaction.Conclusion Acupointshaveacertainspecificity，soclinically，accurateacupointlocationcanincreasetherapeuticeffects. 　　[Keywords]SpecificityofAcupoints；GeneExpression； NeedlingSensationResponse 　　 　　针刺是一种简便而经济的治疗方法，其有效性和安全性已为国内外医学机构所证实。因此针刺疗法已为国内外医者所重视并应用。临床研究显示，针刺腧穴一般具有较好的治疗作用，其作用明显而持久；而针刺非腧穴一般没有治疗作用，两者引起的效应不同。然而其机理不明，近年来，人们逐渐展开针刺机理的研究，但大多集中在临床观察以及形态、细胞、电学等方面，从基因表达水平研究腧穴与非腧穴作用的差异几乎还是空白。本研究采用DDRT-PCR法，展示基因表达图谱，从基因表达的差异分析针刺腧穴与非腧穴效应的不同。 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1.1 材料 　　(1)动物及分组：快速老化模型鼠(SAM-P/10)由日本京都大学引进并在本院成功繁殖。选取60只健康雄性SAM-P/107月龄小白鼠随机分为非针刺组、针刺腧穴组及针刺非腧穴组，每组20只，其饲养条件和生活环境完全一致。 　　(2)试剂：RNAgents○RTOTALRNAIsolationSystem，RNase-FreeDNase，RNasin，TaqDNApoly-merase购自Promega公司，ReverseTranscriptaseⅡ购自GIBCOBRL公司，引物NNNNNN，随机引物S101-S120，S479-S520购自Sangon公司。 　　 　　1.2 方法 　　(1)穴位选择及针刺方法：根据中国针灸学会实验针灸研究会制定的动物针灸穴位图谱，穴位组取内关水沟及太冲，内关及太冲用捻转泻法20s，水沟用雀啄手法强刺激10次；非穴组选择双胁下固定非穴点，作为对照刺激点，行平补平泻捻转手法各20s。针刺组每日针1次，7日停针1次，非针刺组进行与针刺组相同程度和时间的捉抓。2周后，各组动