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黄瓜皮抑菌活性研究 　　【摘要】采用滤纸片扩散法测定各种浓度的黄瓜皮对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、青霉四种菌种的抑制作用。100％、75％浓度的黄瓜皮汁液抑菌圈直径较大，抑菌效果非常明显，而50％浓度的黄瓜皮汁液的抑菌效果则不明显。鉴于黄瓜皮的抑菌效果，可将其粗制品作为天然防腐剂。 　　【关键词】 黄瓜皮；滤纸片法；抑菌活性；天然防腐剂 　　 　　1 引言 　　 　　黄瓜是人们日常生活中比较喜欢而又经常食用的一种蔬菜。黄瓜含水分为98％，并含有微量的维生素C、胡萝卜素及少量糖类、蛋白质、钙、磷、铁等人体必需营养素[1]。100克新鲜黄瓜中瓜皮的维生素C含量为19.79毫克，是其肉质部的3倍多。很多人食用黄瓜时削皮的做法，其实是丢弃了黄瓜中维生素 C含量最丰富的部分。黄瓜皮中还含有较多的苦味素，是黄瓜的营养精华所在。还含有绿原酸和咖啡酸，能起到抗菌消炎和刺激白细胞吞噬的作用。从营养学角度出发，黄瓜皮所含营养素丰富应保留生吃。但由于农药污染问题严重，妨碍了人们带皮食用黄瓜。鉴于黄瓜皮的营养性、食用安全性和抑菌活性，可将黄瓜皮的粗制品作为天然防腐剂，安全无毒，性能稳定，还具有一定的营养价值[2-4]。 　　 　　2 材料与方法 　　 　　2.1 材料与设备 　　黄瓜皮：采用攀枝花当地市场购买的新鲜黄瓜（大地生长，生长期7-10天），取其皮，不带瓜肉。制取过程：黄瓜→洗净→清水浸泡半小时→蒸馏水冲洗→削皮→备用。 　　培养基：牛肉膏蛋白胨培养基和察氏培养基。 　　菌种：枯草芽孢杆菌(Bacillus subtitles)，大肠杆菌(Escherichia coli)，黑曲霉(Aspergillums Niger)，青霉(Penicillium)（攀枝花学院生物与化学工程学院生物实验室提供）打孔器，榨汁机，无菌操作台。 　　2.2 分析方法 　　采用滤纸片扩散法[5]，由于滤纸片已浸渍有黄瓜皮汁液，如果黄瓜皮汁液能杀死或抑制平皿中试验菌的生长，则在滤纸片周围会出现一个无菌生长的透明带，即抑菌圈，抑菌圈直径越大，说明黄瓜皮汁液对此种试验菌的抑制效果越好。 　　2.4.1 黄瓜皮汁液的制备 　　取黄瓜皮100克放入烧杯。然后将黄瓜皮放入榨汁机中压榨成汁，取10ml。再用适量蒸馏水以1:3、1:1分别制成浓度为75％、50％的试液备用。 　　2.4.2 菌悬液的制备 　　每种菌种分别挑取两环菌苔，各用无菌水制成含菌数为106cfu／ml的菌悬液使用。 　　2.4.3抑菌圈的测定 　　采用滤纸片扩散法，用打孔器将滤纸制成直径6mm的圆片，160℃灭菌30min备用。再用无菌镊子将滤纸片放入不同浓度的黄瓜皮提取液中，每种浓度的提取液用3片滤纸片浸泡，将各种待试菌悬液各取1ml在固体培养基上涂布制得含菌平板，用无菌镊子将浸透各种浓度的的滤纸片贴在含菌平板上，每个平皿等距离放四片，其中三片浸过新鲜黄瓜皮的提取液，另外一片只浸有生理盐水。每个处理做三次重复，把每个处理过的培养皿放到恒温培养箱中培养。将枯草芽孢杆菌和大肠杆菌于37℃的恒温培养箱里培养24小时，将青霉和黑曲霉置于28℃的恒温培养箱里培养48小时。之后再用普通直尺对光测量抑菌圈直径的大小，比较各原液对各试验菌种的抑菌效力。 　　 　　3 结果与分析 　　 　　3.1 抑菌圈直径的测定 　　 　　从表3.2可以看出，75％浓度的黄瓜皮汁对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、青霉都有一定的抑制作用，抑菌效果略弱。且对霉菌的抑制作用明显强于细菌。 　　表3.3 50％的黄瓜皮汁的抑菌效果 　　 　　从表3.3可以看出50％浓度的黄瓜皮汁的抑菌效果不太明显。在枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、青霉的培养基中均无明显抑菌圈出现，黑曲霉培养基中的抑菌圈直径也非常小。 　　3.2 实验数据分析 　　从实验所得数据可以看出黄瓜皮对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、黑曲霉、青霉这四种菌都有较明显的抑制作用。且对每种菌抑制效果各不相同。其抑制效果均随黄瓜皮汁浓度的增加而增强，表明黄瓜皮中含有对细菌、霉菌具较强抑制作用的活性物质。黄瓜皮之所以具有抑菌作用可能是因为其含有绿原酸和咖啡酸，能起到抗菌消炎和刺激白细胞吞噬的作用。从表3.1、表3.2、表3.3数据对比可以看到，黄瓜皮在较高浓度如100％、75％的抑菌效果非常明显，抑菌圈直径较大，而50％的黄瓜皮汁的抑菌效果则不明显。 这可能是由于黄瓜皮水浸液中抗菌成分含量较低，吸附在滤纸片上的有效抑菌成分极少，所以采用此浓度做抑菌试验时看不见明显抑菌圈或者完全没有。 　　可见黄瓜皮对食品中常见的典型细菌和霉菌均有抑制作用，而且无毒害、无副作用，营养丰富，性质稳定，可用作食品、日用品和保健品的天然防腐剂。 　　 　　4