食品中维生素c含量的测定课件.pptVIP

三、维生素C的测定　 维生素C：是一种己糖醛基酸，具有抗坏血病的作用，所以又称抗坏血酸，包括还原型抗坏血酸和氧化型抗坏血酸（脱氢抗坏血酸） 存在：新鲜的植物组织。特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等含量丰富。 测定方法： （1）2，6-二氯靛酚滴定法：测定还原型抗坏血酸，2003年新制定的标准中已不用。 （2）2，4二硝基苯肼比色法：测定还原型抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总含量。 （3）高效液相色谱法：测定还原型抗坏血酸和脱氢抗坏血酸的总含量。 2，4二硝基苯肼比色法测定维生素C的含量（GB/T5009.86-2003） 1.原理 　　先将样品中的还原型抗坏血酸用活性炭氧化为脱氢抗坏血酸，加2，4－二硝基苯肼生成红色脎，根据脎在硫酸溶液中的含量与总抗坏血酸含量成正比进行比色测定。 2.试剂 提取Vc用：20g/L草酸，10 g/L草酸 氧化处理用：活性炭（经HCl处理无铁离子） 控制氧化用：20g/L硫脲、10g/L硫脲 显色用：20g/L　2，4－二硝基苯肼溶液，硫酸 1mg/mL抗坏血酸标准溶液 3.主要仪器与药品试剂 试剂：活性炭 硫脲 2,4-二硝基苯肼 85%硫酸 橙汁 草酸 橘子 梨 仪器：恒温箱或恒温水浴锅 　可见－紫外分光光度计 　吸量管、容量瓶、比色管多支 4.操作步骤 ⑴样品中Vc的提取和处理 ①提取： 干样：橘子（100g）+ 等量2%草酸，磨成匀浆，用1%草酸定容至100mL容量瓶。过滤，得提取液。 鲜样：橙汁　+用1%草酸定容至100mL容量瓶。过滤，得提取液。取滤液10mL+1%草酸10mL，得原液。 注意：不易过滤的样品，可离心沉淀后取上清液再过滤。 ②氧化处理： 取25mL提取液　+　2g活性炭，振摇1min,过滤。要弃去初滤液。 各取滤液2mL于样品管和样品空白管，并在各管加1滴硫脲溶液 ⑶制标准曲线 ①取50mL 1mg/mL抗坏血酸标准溶液,加2g 活性炭，振摇1min,过滤。要弃去初滤液。取10mL滤液，加5.0g硫脲，用10 g/L草酸稀释至500mL容量瓶中，得20ug/mL的抗坏血酸使用液。 ②分别取5、10、20、25、40、50、60mL 20ug/mL的抗坏血酸使用液,分别放入7个容量瓶中，用10 g/L硫脲稀释定容，得标准比色系列为：1、2、4、5、8、10、12ug/mL. ③按⑵步骤呈色，并测定吸光度。 ④以吸光度为纵坐标，以抗坏血酸标准比色系列为横坐标，绘标准曲线。